[Using reporter gene to compare infection efficiency of HIV-1 pseudovirus to suspended and adherent cells].

转染 质粒 病毒学 报告基因 HEK 293细胞 染色 分子生物学 生物 人类免疫缺陷病毒(HIV) 细胞 细胞培养 化学 基因 基因表达 遗传学
作者
Yan Su,Lingling Su,Tao Yin,Baojiang Zhang
出处
期刊:PubMed 卷期号:52 (7): 921-6 被引量:2
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摘要

In order to compare the infection of HIV-1 pseudovirus to suspended and adherent cells, Tzmbl cells containing beta-gal (beta-galactosidase) reporter gene were used here to do the analysis. pseudoviruses were generated by co-transfection of 293T cells with the plasmid pNL43R-E- and HIV envelope expressing plasmid. Supernatant of co-transfected 293T cells was collected and used to infect Tzmbl cells with or without trypsin treatment. Forty-eight hours after infection, beta-gal positive Tzmbl cells and virus infection were determined using X-gal staining and beta-glo (beta-galactosidase) assay.The efficiency of HIV pseudoviruses infection of suspended Tzmbl cell was higher than that of adherent cells and the increase of infection correlated with the pseudoviral subtype.This study may provide a useful method for HIV biological study and neutralization assays using a single-round replicative pseudovirus in the future.

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