In vivomonitoring of amine neurotransmitters using microdialysis with on-line capillary electrophoresis

微透析 毛细管电泳 色谱法 化学 分析物 异吲哚 反应杯 牛磺酸 荧光 体内 氨基酸 分析化学(期刊) 生物化学 立体化学 生物 物理 生物技术 量子力学 细胞外
作者
Michael T. Bowser,Robert T. Kennedy
出处
期刊:Electrophoresis [Wiley]
卷期号:22 (17): 3668-3676 被引量:158
标识
DOI:10.1002/1522-2683(200109)22:17<3668::aid-elps3668>3.0.co;2-m
摘要

Microdialysis sampling was coupled via a flow-gated interface on-line to capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence (LIF) detection for in vivo monitoring of neuroactive amino acids and amines. In the instrument, analytes are derivatized precolumn with o-phthaldehyde and β-mercaptoethanol to form fluorescent isoindole products. The instrument was improved over previous designs by incorporating a sheath-flow cuvette for reduced background in LIF detection which improved sensitivity by 15-fold. The methodology was improved by utilizing a voltage ramped injection which allowed generation of 500 000 theoretical plates with 20 s separations. Resolution of the isoindole derivatives was further improved by addition of hydroxypropyl-modified β-cyclodextrin to the electrophoresis buffer. The new instrumentation and methods allow resolution and detection of glutamate, γ-aminobutyric acid, glycine, aspartate, serine, taurine, glutamine and dopamine (if levels are elevated) collected from in vivo sampling probes every 20 s. The technique is suited to continuous monitoring for dynamic measurements of these compounds in vivo.
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