基于GFP/SCL-tTA/Bcr-abl转基因小鼠建立CML嵌合小鼠模型

目的建立慢性粒细胞白血病（CML）的转基因嵌合小鼠模型,为靶向白血病干细胞（LSCs）治疗CML的研究提供良好的动物模型。方法将Bcr-abl转基因小鼠与SCL-t TA转基因小鼠进行杂交,子代小鼠再与GFP转基因小鼠杂交,PCR鉴定Bcr-abl、t TA和GFP基因三阳性的小鼠（GFP/SCL-t TA/Bcr-abl小鼠）。通过诱导GFP/SCL-t TA/Bcr-abl小鼠Bcr-abl基因表达4周后,取其骨髓白细胞移植至经致死剂量（900 c Gy）辐照的FVB/N野生型小鼠。移植3周后,采用Western blotting检测Bcr-abl蛋白表达,流式细胞术检测小鼠外周血GFP＋中性粒细胞的比例以及脾脏和骨髓GFP＋LSCs的比例。结果 PCR结果显示,GFP/SCL-t TA/Bcr-abl小鼠骨髓细胞成功植入FVB/N受体小鼠;Western blotting检测结果显示,移植小鼠的骨髓细胞中表达Bcr-abl蛋白;流式细胞术结果显示,移植小鼠的外周血GFP＋中性粒细胞比例以及脾脏和骨髓GFP＋LSCs的比例明显升高。结论成功建立了GFP/SCL-t TA/Bcr-abl转基因CML嵌合小鼠模型。