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 利用CRISPR/Cas9技术创制水稻苗期耐盐新种质 |
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利用CRISPR/Cas9技术创制水稻苗期耐盐新种质 周雷1韩晓丽1,2徐华山1黄见良2游艾青1 1. 粮食作物种质创新与遗传改良湖北省重点实验室/湖北省农业科学院粮食作物研究所2. 华中农业大学植物科学技术学院 摘要：【研究背景】耐盐碱水稻作为沿海滩涂和盐碱地改良的首选粮食作物,综合利用潜力巨大。通过创新耐盐碱水稻种质,培育耐盐碱水稻新品种并大面积推广应用,是保障世界粮食安全的重要举措之一。【材料与方法】本研究以育种骨干亲本三系恢复系R192为受体,利用CRISPR/Cas9技术定向编辑控制水稻耐盐性的主效Os RR22基因,在外显子区设计了两个不同特异靶位点构建Cas9/gRNA表达载体,通过农杆菌介导的籼稻品种转化方法获得转基因植株。【结果与分析】获得Os RR22基因敲除的转基因T0代8个单株,利用PCR扩增、序列比对方法对转基因苗进行筛选,在T2代鉴定出OsRR22基因敲除纯合且不含转基因载体骨架的突变株系M16和M18,分别在外显子区+1bp和-20bp。在三叶一心期用浓度为0.4%和0.8%两种Na Cl溶液进行了苗期耐盐性鉴定,结果表明:在无盐处理的条件下,突变体M16、M18与野生型R192的株高、绿叶数、总干重和总鲜重无显著差异。但在两种盐浓度处理后,突变体M16、M18与野生型R192的株高、绿叶数、总干重和总鲜重呈现极显著差异;其中,突变体M16、M18、野生型R192在两种胁...更多 关键词： 水稻;耐盐;种质创新;基因敲除;OsRR22; 基金： 国家科技支撑计划项目(2015BAD01B01); 会议名称： 第十九届中国作物学会学术年会 会议时间： 2020-11-08 会议地点： 中国湖北武汉 专辑： 农业科技 专题： 农作物 DOI： 10.26914/c.cnkihy.2020.047941 分类号： S511 |
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