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[高分] 学位论文 重组RIG-I蛋白的表达,纯化及其结晶学研究
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| 其它 | 维甲酸诱导基因-I(Retinoic acid-inducible gene-I, RIG-I)是一种新发现的模式识 别受体,能够识别细胞质中的病毒RNA,已经被鉴定为RNA 病毒感染的细胞传感 元件, 通过RLR ( RIG-I like receptors ) 级联信号, 与线粒体衔接蛋白 MAVS/IPS-l/VISA/Cardif 相互作用,然后诱导干扰素和促炎症细胞因子的产生.RLR 信号通路既受宿主和各种环境的严格调控,也能够作为病毒逃避宿主干扰素反应的 靶点.很多RNA 病毒能通过不同策略阻断RLR 信号通路,从而逃避宿主的天然抗 病毒免疫反应. RIG-I 基本结构为:C 端包含一抑制区(repressor domain, RD);中间为带有 DExD/H 盒的RNA 解旋酶(RNA helicase)结构域,以ATP 酶依赖的方式解旋dsRNA; N-端效应结构域为2 个串联的胱天蛋白酶招募结构域(caspase recruitment domain, CARD),此结构域负责传递信号,在细胞中过表达CARD 可诱导IFN 的产生.RIG-I 的RD 结构域的晶体结构表明,RIG-I C-末端抑制结构域(repressor domain, RD)以5'- 三磷酸基团依赖形式结合病毒RNA.RD的晶体结构表明RD为结构上与Rab 样GTP 酶GDP/GTP 交换因子相关的锌结合域,其锌配位点为RIG-I 信号所必需.结构引 导突变鉴定到一正电荷凹槽可能是RIG-I 的5'-三磷酸基团结合位点,它不同于 MDA5 和LGP2 中凹槽,表明了RD 可能赋予配体结合特异性. |
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