甘油感受态会导致潮霉素B抗性嘛？

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玉子卿来自贵州，发表于：2023-02-23 12:00:22

事情是这样的，我在做电转化过程中需要用甘油洗菌做感受态，但是目前遇到一个问题，就是这株菌在做感受态前是没有潮霉素B抗性的，但是在做完感受态后具有了潮霉素B抗性，可以排除抗生素失效，都是现配现用，涂过别的菌不长；也可以排除实验过程污染，因为两个人不同环境，不同时间点，不同菌做得到了一样的结果，另外也不是电转杯污染，因为没电转只是做了感受态就忽然有抗性了。想请教一下各位研友，有人出现类似情况或者还有可能是别的原因导致的吗？另外，我还查了一下潮霉素B的杀菌原理，是通过诱导80S核糖体错识干扰蛋白合成杀菌。

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椅子

玉子卿 (楼主) 2023-02-25 00:07:41 发布自贵州，

在水一方：出现这种情况可能是由于以下原因：
1. 感受态过程中使用的甘油或其他试剂中存在有机物质，这些有机物质可能会导致菌体发生突变，从而获得抗性。
2. 感受态过程中的电场强度过高，可能会导致菌体DNA的损伤和突变，从而获得抗性。
3. 感受态后细胞生长状态不佳，可能会导致菌体产生抗性，因为在不适宜的生长条件下，菌体会通过突变来适应环境。
4. 感受态后的细胞可能存在遗传测序或克隆污染，导致出现异常结果。

对于这个问题，建议您可以尝试以下方法：
1. 在感受态过程中使用纯度更高的试剂，减少可能存在的有机物质。
2. 调整电场强度，避免过高的电场强度对菌体造成损伤。
3. 确保感受态后细胞的生长状态良好，使用适宜的培养条件。
4. 进一步检查遗传测序或克隆污染的可能性，确保实验结果的准确性。

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好的，非常感谢，我去试试

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沙发

在水一方站长 2023-02-23 16:53:41 发布自乌克兰，

出现这种情况可能是由于以下原因：
1. 感受态过程中使用的甘油或其他试剂中存在有机物质，这些有机物质可能会导致菌体发生突变，从而获得抗性。
2. 感受态过程中的电场强度过高，可能会导致菌体DNA的损伤和突变，从而获得抗性。
3. 感受态后细胞生长状态不佳，可能会导致菌体产生抗性，因为在不适宜的生长条件下，菌体会通过突变来适应环境。
4. 感受态后的细胞可能存在遗传测序或克隆污染，导致出现异常结果。

对于这个问题，建议您可以尝试以下方法：
1. 在感受态过程中使用纯度更高的试剂，减少可能存在的有机物质。
2. 调整电场强度，避免过高的电场强度对菌体造成损伤。
3. 确保感受态后细胞的生长状态良好，使用适宜的培养条件。
4. 进一步检查遗传测序或克隆污染的可能性，确保实验结果的准确性。

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