A Lateral Flow Assay Based on Streptavidin‐biotin Amplification System with Recombinase Polymerase Amplification for Rapid and Quantitative Detection of Salmonella enteritidis

重组酶聚合酶扩增 链霉亲和素 PCR的应用 沙门氏菌 重组酶 生物 聚合酶链反应 肠炎沙门氏菌 生物素 分子生物学 微生物学 环介导等温扩增 DNA 数字聚合酶链反应 遗传学 细菌 基因 重组
作者
Fan Feng,Qiang Fu,Fengrong Cao,Yun Yuan,Ruixue Kong,Dandan Ji,Haiyun Liu
出处
期刊:ChemBioChem [Wiley]
卷期号:25 (3): e202300575-e202300575 被引量:7
标识
DOI:10.1002/cbic.202300575
摘要

Abstract Salmonella constitutes a prevalent alimentary pathogen, instigating zoonotic afflictions. Consequently, the prompt discernment of Salmonella in sustenance is of cardinal significance. Lateral flow assays utilizing colorimetric methodologies adequately fulfill the prerequisites of point‐of‐care diagnostics, however, their detection threshold remains elevated, generally permitting only qualitative discernment, an impediment to the preliminary screening of nascent pathogens. In response to this conundrum, we propose a lateral flow diagnostic predicated upon a streptavidin‐biotin amplification system with recombinase polymerase amplification engineered for the expeditious and quantitative discernment of Salmonella enteritidis . Trace nucleic acids within a sample undergo exponential amplification via recombinase polymerase amplification to a level discernable, constituting the initial signal amplification. Subsequently, along the test line (T‐line) of the lateral flow strip, the chromatic signal undergoes augmentation by securing a greater quantity of AuNPs through the magnification capacity of the streptavidin‐biotin mechanism, affecting the second signal amplification. Quantitative results are procured via smartphone capture and transferred to computer software for precise calculation of the targeted quantity. The lateral flow strip exhibits a LOD at 19.41 CFU/mL for cultured S. enteritidis . The RSD of three varying concentrations were respectively 3.74 %, 5.96 %, and 4.25 %.
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