用高效液相色谱（HPLC）法测定血清维生素C含量

目的: 建立更简便、快速、准确、灵敏的测定血清维生素C(VC)含量的方法,并对血清VC稳定性进行研究. 方法: 血清样品经10%偏磷酸溶液提取,旋涡混匀30 s,离心10 min(4 000 r/min, 4 ℃)后,用带二极管阵列检测(DAD)的高效液相色谱(HPLC)仪对VC进行定性定量分析.流动相为100 mmol/L KH2PO4,pH值为3.0,检测波长为243 nm,流速为11 ml/min. 结果: 在上述色谱条件下,血清中VC能得到良好分离,该法的日内变异系数和日间变异系数分别为0.42%和2.11%;回收率82%～88.5%;VC的最低检测限为0.05 μg/ml.在对血清VC稳定性的研究中,发现血清VC在放置过程中很容易被氧化降解,其偏磷酸提取液相对稳定,但在5 d后含量也开始明显下降,到第44 d后血清和提取液中VC含量均几乎完全消失. 结论: 建立了高速、高效、高灵敏度的测定血清VC含量的HPLC法.血清VC应立即测定,或将样品用偏磷酸提取,保存在-70℃,5 d以内分析完毕.