Fluorometric determintion of pyridoxal and pyridoxal-5-phosphate

ピリドキサールおよびピリドキサール-5-リン酸はイソ酪酸ヒドラジドと反応してヒドラゾンを生成し,炭酸ナトリウムアルカリ性で緑色の強いけい光(励起極大波長380mμ,けい光極大波長490mμ)を示すので,その強度を測定することによってピリドキサールおよびピリドキサール-5-リン酸のけい光定量法を確立した.ピリドキサールとピリドキサール-5-リン酸は同一条件で定量が可能であり,またピリドキサール-5-リン酸が酸ホスファターゼによって加水分解して生じたピリドキサールを同様の方法で定量できた.そのため酸ホスファターゼを用いる方法を組み合わせると,ピリドキサールおよびピリドキサール-5-リン酸の分離定量が可能となった.ピリドキサールは塩酸塩として0.01～1.0μg/ml,ピリドキサール-5-リン酸は0.1～1.0μg/mlの間で濃度とけい光強度の間に直線関係が成立した.