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[Effects and clinical significance of NLRP3 inflammasome activated by IL-17A in CRSwNP].

鼻息肉 炎症体 吡喃结构域 医学 慢性鼻-鼻窦炎 受体 白细胞介素 免疫印迹 免疫学 免疫荧光 内科学 胃肠病学 细胞因子 抗体 生物 生物化学 基因
作者
Y Li,Y N Zhang,Chang Liu,W Q Huang,Haishi Wu,Xifu Wu,Zenan Huang,G H Zhang
出处
期刊:PubMed 卷期号:58 (7): 690-698 被引量:1
标识
DOI:10.3760/cma.j.cn115330-20220922-00576
摘要

Objective: To investigate the effects and clinical significance of NOD-like receptor family pyrin domain containing 3 (NLRP3) inflammasome activated by interleukin (IL)-17A in chronic rhinosinusitis with nasal polyps (CRSwNP). Methods: Patients underwent nasal endoscopic surgery in the Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University from January 2020 to December 2021 were collected, including 28 CRSwNP (including 19 males and 9 females, aged 19 to 67 years), 22 chronic rhinosinusitis without nasal polyps (CRSsNP) and 22 controls. qRT-PCR was used to detect the expressions of IL-17A, NLRP3, IL-1β and IL-18 in the three groups, and their correlations were analyzed. The positions of IL-17A, NLRP3 and IL-18 in nasal polys were analyzed by immunofluorescence. Western Blotting and ELISA were employed to detect the expression of NLRP3, IL-1β and IL-18 in the human nasal epithelial cells after using IL-17A stimulation or IL-17A receptor inhibitor. Immunofluorescence was used to observe the NLRP3, IL-1β, and IL-18 protein expression after IL-17A stimulating human nasal epithelial cells, and after the use of IL-17A receptor inhibitor and NLRP3 inhibitor MCC950. The correlations between NLRP3, IL-1β, IL-18 and CT scores, nasal endoscopic scores, visual analogue scale (VAS) scores, and sino-nasal outcome test (SNOT) 22 scores of CRSwNP patients were analyzed. SPSS 20.0 software was used for statistical analysis. Results: The expressions of IL-17A, NLRP3, IL-1β and IL-18 in the tissues of CRSwNP patients were significantly higher than those in CRSsNP group(P=0.018,P<0.001,P=0.005, P=0.016) and the control group(all P<0.001). IL-17A was positively correlated with the expression of NLRP3, IL-1β, and IL-18(r ralue was 0.643,0.650,0.629,respectively, all P<0.05). IL-17A, NLRP3, and IL-18 were co-localized in the epithelial propria of polyp tissue. IL-17A stimulated the expressions of NLRP3, IL-1β, and IL-18 in human nasal epithelial cells. After the use of IL-17A receptor inhibitor, the expressions of NLRP3, IL-1β, and IL-18 were significantly down-regulated. After the use of NLRP3 inhibitor MCC950, IL-17A was significantly down-regulated to promote the expression of NLRP3, IL-1β, and IL-18. The expressions of NLRP3, IL-1β and IL-18 were positively correlated with CT, nasal endoscopy, VAS, and SNOT22 scores in patients with CRSwNP. Conclusions: IL-17A promotes the release of IL-1β and IL-18 by activating the NLRP3 inflammasome and aggravates the severity of the disease in CRSwNP.目的: 探讨慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)中白细胞介素(IL)-17A激活NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)的作用及临床意义。 方法: 收集自2020年1月至2021年12月期间在中山大学附属第三医院接受鼻内镜手术治疗的患者标本,其中CRSwNP患者28例(男性19例,女性9例,年龄19~67岁),慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)患者22例(男性14例,女性8例,年龄26~66岁),对照组患者22例(男性13例,女性9例,年龄20~57岁)。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测IL-17A、NLRP3、IL-1β及IL-18在3组中的表达,分析其相关性;组织免疫荧光三染定位分析IL-17A、NLRP3、IL-18在鼻黏膜组织中的位置;蛋白免疫印迹法及酶联免疫吸附试验检测IL-17A刺激原代鼻黏膜上皮细胞及使用IL-17A受体抑制剂后NLRP3、IL-1β及IL-18在细胞中的表达;细胞免疫荧光观察IL-17A刺激原代鼻黏膜上皮细胞后,NLRP3、IL-1β、IL-18蛋白的表达,以及使用IL-17A受体抑制剂和NLRP3抑制剂(MCC950)后,IL-17A刺激原代鼻黏膜上皮细胞NLRP3、IL-1β、IL-18蛋白的表达。分析NLRP3、IL-1β及IL-18与CRSwNP患者CT评分、鼻内镜评分、视觉模拟量表(VAS)评分和鼻腔鼻窦结局测试(SNOT)22评分之间的相关性。采用SPSS 20.0软件对数据进行统计。 结果: CRSwNP组IL-17A、NLRP3、IL-1β及IL-18 mRNA表达明显高于CRSsNP组(P=0.018,P<0.001,P=0.005,P<0.016)及对照组(P值均<0.001),且IL-17A与NLRP3、IL-1β、IL-18的表达存在正相关(r值分别为0.643、0.650、0.629,P值均<0.05)。息肉组织中,IL-17A与NLRP3、IL-18共同定位于上皮层。IL-17A刺激原代鼻黏膜上皮细胞后,NLRP3、IL-1β、IL-18表达增高;使用IL-17A受体抑制剂后,可明显下调NLRP3、IL-1β、IL-18的表达;使用NLRP3抑制剂MCC950后则明显下调IL-17A促进NLRP3、IL-1β及IL-18表达的作用。NLRP3、IL-1β、IL-18的表达与CRSwNP患者CT、鼻内镜、VAS和SNOT22评分存在正相关。 结论: CRSwNP中,IL-17A可通过激活NLRP3炎性小体,促进IL-1β及IL-18的释放,加重疾病的严重程度。.
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