Role of group 2 innate lymphoid cells in mice with atopic dermatitis-like inflammatory response induced by MC903

摘要： 【摘要】 目的 探讨2型固有淋巴样细胞（ILC2）在特应性皮炎（AD）中的作用。方法 以C57BL/6J和Rag1-/-小鼠为研究对象。C57BL/6J小鼠分为模型组和对照组，模型组小鼠两侧耳部连续14 d每日涂抹卡泊三醇（MC903）以制备AD样小鼠模型，对照组仅涂抹无水乙醇，第15天时收集小鼠外周血血清，处死小鼠后，取耳部皮肤行组织病理检查，摘取脾脏，用实时荧光定量PCR检测皮肤和脾中炎症因子表达水平，同时采用流式细胞仪检测皮肤中ILC2比例。Rag1-/-小鼠分为模型组、对照组和实验组，模型组和对照组处理及评估同C57BL/6J小鼠，实验组小鼠在涂抹MC903前2 d开始腹腔注射单克隆抗体CD90.2拮抗ILC2功能，隔2 d 1次，共计7次，每次300 μg/150 μl，其他处理同模型组，第15天时收集小鼠外周血血清，处死小鼠后，取耳部皮肤行组织病理检查，用实时荧光定量PCR检测皮肤中炎症因子表达水平，同时采用流式细胞仪检测皮肤中ILC2比例。采用两独立样本t检验进行两组间比较，单因素方差分析进行多组间比较。结果 模型组C57BL/6J小鼠耳部皮肤可见明显的红肿、干燥、结痂，HE染色可见表皮厚度增加，真皮嗜酸性粒细胞浸润，血清IgE水平［（6751.016 ± 282.324） μg/L］高于对照组［（6387.038 ± 267.853） μg/L，P = 0.007），且皮肤白细胞介素（IL）-4、IL-13和干扰素γ（IFN-γ）的表达水平较对照组明显增高（P值分别为0.005、0.012， < 0.001），而IL-5差异无统计学意义（P = 0.190），脾脏IL-4、IL-5和IL-13的表达较对照组明显增高（均P < 0.001），而IFN-γ差异无统计学意义（P = 0.278）；模型组ILC2比例（5.604 ± 2.105）%较对照组（1.750 ± 1.104）%明显增高（P = 0.003）。在Rag1-/-小鼠中，模型组耳部皮肤也可见明显红肿、干燥、结痂，HE染色可见表皮厚度增加，真皮嗜酸性粒细胞浸润，模型组皮肤IL-4、IL-5、胸腺基质淋巴生成素和IL-33的表达较对照组明显增高（P值分别为0.010、0.043、0.034、0.007），而IL-13和IFN-γ差异无统计学意义（P值分别为0.274，0.697）；模型组ILC2比例（5.165 ± 2.436）%高于对照组［（0.835 ± 0.578）%，P = 0.014］；抗体拮抗Rag1-/-小鼠ILC2后，实验组小鼠皮损较模型组明显减轻，HE染色可见表皮增厚减轻，真皮嗜酸性粒细胞浸润减少，而细胞因子表达分析显示，实验组IL-4、IL-5、IL-13、TSLP、IL-33水平与模型组差异均无统计学意义（均P > 0.05）。结论 ILC2参与了MC903诱导的AD样小鼠炎症反应，且该反应不依赖于适应性免疫。