Transformation ofLactobacillus plantarumby electroporation with in vitro modified plasmid DNA

植物乳杆菌 电穿孔 质粒 大肠杆菌 转化(遗传学) DNA 微生物学 细菌 生物 转化效率 乳酸菌 分子生物学 化学 乳酸 生物化学 基因 遗传学 农杆菌
作者
M. Teresa Alegre,M. Carmen Rodríguez,Juan M. Mesas
出处
期刊:Fems Microbiology Letters [Oxford University Press]
卷期号:241 (1): 73-77 被引量:81
标识
DOI:10.1016/j.femsle.2004.10.006
摘要

An improved method for the electrotransformation of Lactobacillus plantarum CECT 220 (ATCC 8014) with plasmid DNA isolated from Escherichia coli is described. The two main modifications with respect to existing methods are: (i) isolation of plasmid DNA from E. coli JM110 grown in minimal medium and (ii) in vitro modification of the DNA by cell-free extracts of the host L. plantarum. Optimal electrotransformation was obtained with exponentially growing cells of L. plantarum concentrated to 6x10(9) cfu ml-1, with electric pulses of 13 kV cm-1 in cuvettes with 1 mm inter-electrode distance. We consider that this method constitutes a useful tool for routine manipulation of L. plantarum, and can probably be extended to other lactic acid bacteria.
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