壳聚糖-明胶-卡拉胶支架复合人牙龈成纤维细胞的体外研究

目的：研究人牙龈成纤维细胞（human gingival fibroblast cells，HGFs）在壳聚糖-明胶、壳聚糖-明胶-卡拉胶两种支架材料上生长增殖及某些细胞外基质分泌的情况，为研究组织工程化牙龈支架材料提供实验依据。方法：组织块法培养HGFs，将第4代的HGFs分别接种于两种支架材料上，以壳聚糖-明胶-卡拉胶为实验组，壳聚糖-明胶作为对照组。扫描电镜（SEM）观察两种支架材料的结构；四唑盐比色实验（M3YF）法检测HGFs在两种支架材料上的增殖情况；通过酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞-支架复合培养液中Ⅰ型胶原蛋白（CollagenⅠ，ColⅠ）和糖胺多糖（Glycosamlnoglycans，GAG）的含量。结果：扫描电镜显示两种支架材料均呈多孔结构，孔径50～200μm，孔隙率达90％。MTT法检测显示：培养1d实验组与对照组吸光值（A值）差异无统计学意义（P〉0．05）；第3、5、7天时实验组A值明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。ELISA结果显示，培养1d实验组ColⅠ和GAG的含量与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）；第3、5、7天各时间点，实验组ColⅠ和GAG的含量均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：HGFs与壳聚糖-明胶-卡拉胶支架复合后，其生物学行为更为活跃，壳聚糖-明胶-卡拉胶支架比壳聚糖-明胶支架更适合作为组织工程化牙龈的生物支架材料。