Delaying effect of pyrroloquinoline quinone on age-related skin aging in mice and its mechanisms

摘要： 【摘要】 目的 研究吡咯喹啉醌对小鼠年龄相关皮肤衰老的作用及机制。方法 将昆明种小鼠SPF级喂养，分为3组，每组10只，年轻组用普通饮食喂养8个月，年老组用普通饮食喂养20个月构建小鼠自然衰老模型，吡咯喹啉醌组在每公斤普通饮食饲料中添加吡咯喹啉醌4 mg喂养20个月。喂养结束后，取各组小鼠背部皮肤组织，HE染色检测皮肤表皮和真皮厚度；Masson染色检测皮肤总胶原变化；免疫组化检测增殖蛋白Ki67表达变化；透射电镜检测皮肤自噬体变化；Western印迹检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p62表达变化，各组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。结果 HE和Masson染色显示，年老组表皮厚度［（15.67 ± 0.36） μm］和真皮厚度［（87.95 ± 11.86） μm］以及总胶原阳性百分率［（22.12 ± 1.72）%］均显著低于年轻组［（29.37 ± 0.25） μm、（264.93 ± 10.34） μm、（45.03 ± 1.54）%，均P＜0.05］，而吡咯喹啉醌组表皮厚度［（25.53 ± 0.47） μm］和真皮厚度［（145.01 ± 9.71） μm］以及总胶原阳性百分率［（31.17 ± 1.20）%］较年老组增加（均P＜0.05）。免疫组化结果显示，年老组皮肤增殖蛋白Ki67阳性细胞表达率［（13.74 ± 3.06）%］低于年轻组［（29.07 ± 2.79）%，P＜0.05］和吡咯喹啉醌组 ［（21.20 ± 1.47）%，P＜0.05］。透射电镜观察显示，年老组与年轻组比较，皮肤自噬体数量增加（P＜0.05），吡咯喹啉醌组自噬体数量较年老组减少（P＜0.05）。Western印迹实验显示，与年轻组比较，年老组Beclin-1表达降低（P＜0.05），LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值下降（P＜0.05），p62表达升高（P＜0.05）；而吡咯喹啉醌组与年老组比较，Beclin1表达升高（P＜0.05），LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增加（P＜0.05），p62表达降低（P＜0.05）。结论 吡咯喹啉醌能够延缓小鼠皮肤衰老，其机制可能与增加小鼠皮肤细胞增殖能力和促进皮肤自噬水平相关。