CRISPR/LbCas12a-Mediated Genome Editing in Soybean

基因组编辑 清脆的 可选择标记 基因组 转化(遗传学) 生物 计算生物学 基因 农杆菌 遗传学
作者
Dawei Liang,Yubo Liu,Chao Li,Wen Qin,Jianping Xu,Lizhao Geng,Chunxia Liu,Huaibing Jin,Yang Gao,Heng Zhong,John William Dawson,Bin Tian,Brenden Barco,Xiujuan Su,Shujie Dong,Changbao Li,Elumalai Sivamani,Qiudeng Que,Ian Jepson,Liang Shi
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:: 39-52 被引量:9
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-3131-7_3
摘要

Currently methods for generating soybean edited lines are time-consuming, inefficient, and limited to certain genotypes. Here we describe a fast and highly efficient genome editing method based on CRISPR-Cas12a nuclease system in soybean. The method uses Agrobacterium-mediated transformation to deliver editing constructs and uses aadA or ALS genes as selectable marker. It only takes about 45 days to obtain greenhouse-ready edited plants at higher than 30% transformation efficiency and 50% editing rate. The method is applicable to other selectable markers including EPSPS and has low transgene chimera rate. The method is also genotype-flexible and has been applied to genome editing of several elite soybean varieties.
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