Epitranscriptome Mapping of N6-Methyladenosine Using m6A Immunoprecipitation with High Throughput Sequencing in Skeletal Muscle Stem Cells

N6-甲基腺苷 免疫沉淀 转录组 生物 信使核糖核酸 骨骼肌 细胞生物学 核糖核酸 干细胞 计算生物学 分子生物学 基因 基因表达 遗传学 解剖 甲基转移酶 甲基化
作者
Justin J. Law,Stefan Günther,Shuichi Watanabe
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:: 431-443
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-3036-5_29
摘要

N6-Methyladenosine (m6A), one of the most abundant chemical modifications in mRNA (epitranscriptome), contributes to the regulation of biological processes by iterating gene expression post-transcriptionally. A number of publications on m6A modification have escalated in the recent past, due to the advancements in profiling m6A along the transcriptome using different approaches. The vast majority of studies primarily focused on m6A modification on cell lines but not primary cells. We present in this chapter a protocol for m6A immunoprecipitation with high throughput sequencing (MeRIP-Seq) that profiles m6A on mRNA with merely 100 μg total RNA worth of muscle stem cells as starting material. With this MeRIP-Seq, we observed epitranscriptome landscape in muscle stem cells.
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