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[高分]
 Establishment of an infectious RNA transcription system for Striped jack nervous necrosis virus, the type species of the betanodaviruses betanodaviruses的模式种条纹杰克神经坏死病毒感染性RNA转录系统的建立
相关领域
生物
分子生物学
互补DNA
核糖核酸
聚腺苷酸
病毒学
质粒
重组DNA
病毒
DNA
基因
遗传学
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| 其它 | 该文献已经建立了一个系统来生产条纹杰克神经坏死病毒（SJNNV）的感染性RNA转录本，SJNNV是感染鱼类的贝塔诺病毒的典型物种。酶学分析表明，SJNNV的RNA1和RNA2都有5'帽。这两种RNA在很大程度上对3'聚腺苷酸化和连接具有抗性，表明存在干扰性的3'结构，而少量病毒RNA在体外被聚腺苷酸化。采用cDNA末端快速扩增法测定两个片段的完整5'和3'非编码序列。基于获得的末端序列，进行RT-PCR，构建含有两种RNA全长cDNA拷贝的质粒克隆，位于T7启动子下游。这些质粒在每个SJNNV序列3'末端下游的一个独特限制性位点被切割，并在体外转录成具有帽结构类似物的RNA。将转录物的混合物转染到鱼细胞系E-11中。 |
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