有大佬知道怎么合成poly-HRP和poly-ALP吗（不含链霉亲和素的）？或者有没有相关书籍

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梧桐树的智慧来自江苏，发表于：2023-02-17 10:10:04

有大佬知道怎么合成poly-HRP和poly-ALP吗（不含链霉亲和素的）？或者有没有相关书籍，能连接到二抗，免疫组化用

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梧桐树的智慧 (楼主) 2023-02-17 16:24:49 发布自江苏，

在水一方： Poly-HRP和Poly-ALP是指多价的辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（ALP）标记二抗，它们能够提高免疫组化的检测灵敏度和特异性。这些多价标记二抗可以通过化学交联或共价结合方法制备。
下面是一种制备poly-HRP的方法：
1. 准备好单价的HRP标记二抗和二胺基多聚物（例如聚乙二醇二胺）。
2. 溶解二胺基多聚物在缓冲液中，pH值调节到碱性（pH 8-9）。
3. 加入足量的EDC和NHS交联剂，使其激活。
4. 将HRP标记二抗加入到交联剂中，与二胺基多聚物共价结合。反应通常在室温下进行几个小时。
5. 过滤除去未反应的交联剂和HRP标记单体。
6. 将制备好的poly-HRP标记二抗保存在低温（例如-20°C）下，并在使用前进行验证。
制备poly-ALP的方法与制备poly-HRP类似，只是需要使用ALP标记的二抗，并在交联剂中添加羧基化的多胺聚合物（例如聚丙烯酸二胺）。
关于这方面的书籍，可以参考《Molecular Probes Handbook》，这是一本由Thermo Fisher Scientific出版的手册，涵盖了各种生物标记物的制备、应用和优化方法。此外，还可以参考其他免疫组化实验手册和论文，以获取更多有关多价标记二抗的信息。

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非常感谢站长！！！敬礼

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沙发

在水一方站长43 2023-02-17 15:31:37 发布自乌克兰，

Poly-HRP和Poly-ALP是指多价的辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（ALP）标记二抗，它们能够提高免疫组化的检测灵敏度和特异性。这些多价标记二抗可以通过化学交联或共价结合方法制备。
下面是一种制备poly-HRP的方法：
1. 准备好单价的HRP标记二抗和二胺基多聚物（例如聚乙二醇二胺）。
2. 溶解二胺基多聚物在缓冲液中，pH值调节到碱性（pH 8-9）。
3. 加入足量的EDC和NHS交联剂，使其激活。
4. 将HRP标记二抗加入到交联剂中，与二胺基多聚物共价结合。反应通常在室温下进行几个小时。
5. 过滤除去未反应的交联剂和HRP标记单体。
6. 将制备好的poly-HRP标记二抗保存在低温（例如-20°C）下，并在使用前进行验证。
制备poly-ALP的方法与制备poly-HRP类似，只是需要使用ALP标记的二抗，并在交联剂中添加羧基化的多胺聚合物（例如聚丙烯酸二胺）。
关于这方面的书籍，可以参考《Molecular Probes Handbook》，这是一本由Thermo Fisher Scientific出版的手册，涵盖了各种生物标记物的制备、应用和优化方法。此外，还可以参考其他免疫组化实验手册和论文，以获取更多有关多价标记二抗的信息。

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有大佬知道怎么合成poly-HRP和poly-ALP吗（不含链霉亲和素的）？或者有没有相关书籍

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