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Porphyromonas endodontalis reactivates latent Epstein–Barr virus

分子生物学 生物 细胞培养 信使核糖核酸 荧光素酶 污渍 生物化学 基因 转染 遗传学
作者
Kosuke Makino,Osamu Takeichi,Kenichi Imai,Hiroko Inoue,Kuniyuki Hatori,Kazuma Himi,Ichiro Saito,Kuniyasu Ochiai,Bunnai Ogiso
出处
期刊:International Endodontic Journal [Wiley]
卷期号:51 (12): 1410-1419 被引量:20
标识
DOI:10.1111/iej.12959
摘要

Abstract Aim To determine whether Porphyromonas endodontalis can reactivate latent Epstein–Barr virus ( EBV ). Methodology The concentrations of short‐chain fatty acids ( SCFA s) in P. endodontalis culture supernatants were determined using high‐performance liquid chromatography. A promoter region of Bam HI fragment Z leftward open reading frame 1 ( BZLF ‐1), which is a transcription factor that controls the EBV lytic cycle, was cloned into luciferase expression vectors. Then, the luciferase assay was performed using P. endodontalis culture supernatants. Histone acetylation using Daudi cells treated with P. endodontalis culture supernatants was examined using Western blotting. BZLF ‐1 mRNA and Bam HI fragment Z EB replication activator ( ZEBRA ) protein were also detected quantitatively using real‐time polymerase chain reaction ( PCR ) and Western blotting. Surgically removed periapical granulomas were examined to detect P. endodontalis , EBV DNA , and BZLF ‐1 mRNA expression using quantitative real‐time PCR . Statistical analysis using Steel tests was performed. Results The concentrations of n ‐butyric acid in P. endodontalis culture supernatants were significantly higher than those of other SCFA s ( P = 0.0173). Using B‐95‐8‐221 Luc cells treated with P. endodontalis culture supernatants, the luciferase assay demonstrated that P. endodontalis induced BZLF ‐1 expression. Hyperacetylation of histones was also observed with the culture supernatants. BZLF ‐1 mRNA and ZEBRA protein were expressed by Daudi cells in a dose‐dependent manner after the treatment with P. endodontalis culture supernatants. P. endodontalis and BZLF ‐1 in periapical granulomas were also detected. The expression levels of BZLF ‐1 mRNA were similar to the numbers of P. endodontalis cells in each specimen. Conclusions n ‐butyric acid produced by P. endodontalis reactivated latent EBV .
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