A novel cytological technique for bacterial detection on canine skin

Cytological examination of the skin is an important diagnostic technique in dermatology for disease diagnosis and monitoring of treatment. Impression smear and tape-strip preparation are gold standard cytological techniques. This study introduces a novel cytological method, slurry preparation, in which debris collected from the skin surface is macerated in warm sterile water and dried on the slide.To compare organism yield between a novel and two standard cytological collection techniques by evaluating bacteria and Malassezia yeast counts.Thirty client-owned dogs diagnosed with atopic dermatitis and lesions consistent with pyoderma and/or Malassezia dermatitis.In a prospective, blinded comparison study, dermatological lesions from each dog were sampled using impression smear, tape-strip and slurry preparation methodologies. Ten random reticle fields per lesion, accounting for a total area of 6.25 × 10-3 mm2 (equivalent to ˜5% of a typical ×40 field), were evaluated by light microscopy for each cytological method. Bacterial and Malassezia organisms were measured as counts/sample. The slurry preparation was compared to each of the standard methodologies separately using paired Student's t-tests.The slurry preparation was demonstrated to be more sensitive than gold standard techniques in detecting bacteria, with mean differences of 12.7 and 13.5 additional bacteria per cytological sample, compared to the impression and tape-strip preparations, respectively. The slurry preparation did not differ significantly in detecting Malassezia organisms compared with impression smear preparation. The tape-strip preparation was demonstrated to be more sensitive than the slurry preparation in the detection of Malassezia organisms, finding a mean difference of 0.22 more organisms per sample.Slurry preparation presents advantages over the gold standard techniques in the detection of bacteria which can help to manage canine pyoderma more appropriately. Performing a slurry preparation in cases of suspected canine pyoderma could be considered as an alternative to the gold standard techniques.L'examen cytologique de la peau est une technique diagnostique importante en dermatologie pour le diagnostic, la surveillance et le traitement des maladies. La préparation de calques par impression et de test à la cellophane adhésive sont des techniques cytologiques de référence. Cette étude présente une nouvelle méthode cytologique dans laquelle les débris collectés à la surface de la peau sont macérés dans de l'eau stérile tiède et séchés sur la lame. HYPOTHÈSE/OBJECTIFS: Comparer le rendement des organismes entre une nouvelle et deux techniques de collecte cytologiques standard en évaluant le nombre de bactéries et de levures Malassezia.Trente chiens appartenant à des clients diagnostiqués avec une dermatite atopique et des lésions compatibles avec une pyodermite et/ou une dermatite à Malassezia. MATÉRIELS ET METHODS: Dans une étude comparative prospective en aveugle, les lésions dermatologiques de chaque chien ont été échantillonnées à l'aide de calque par impression, test à la cellophane adhésive et suspension. Dix champs par lésion, représentant une surface totale de 6,25 × 10-3 mm2 (équivalent à ~5% d'un champ typique × 40), ont été évalués par microscopie optique pour chaque méthode cytologique. Les organismes bactériens et Malassezia ont été mesurés en nombres/échantillon. La préparation de la suspension a été comparée à chacune des méthodologies standard séparément en utilisant des tests t de Student appariés. RÉSULTATS: La préparation de la suspension s'est avérée plus sensible que les techniques de référence pour la détection des bactéries, avec des différences moyennes de 12,7 et 13,5 bactéries supplémentaires par échantillon cytologique, par rapport aux préparations de calque et de cellophane adhésive, respectivement. La préparation de la suspension ne différait pas significativement dans la détection des organismes Malassezia par rapport à la préparation de calque. La préparation de cellophane adhésive s'est avérée plus sensible que la préparation de suspension dans la détection des organismes Malassezia, trouvant une différence moyenne de 0,22 organismes de plus par échantillon.La préparation de la suspension présente des avantages par rapport aux techniques de référence dans la détection des bactéries qui peuvent aider à gérer de manière plus appropriée la pyodermite canine. La réalisation d'une suspension en cas de suspicion de pyodermite canine pourrait être considérée comme une alternative aux techniques de référence.INTRODUCCIÓN: el examen citológico de la piel es una técnica de diagnóstico importante en dermatología para el diagnóstico, seguimiento y tratamiento de enfermedades. El frotis de impresión y la preparación con cinta adhesiva son técnicas citológicas estándar de referencia. Este estudio presenta un método citológico novedoso, la preparación en suspensión, en el que los desechos recogidos de la superficie de la piel se maceran en agua tibia estéril y se secan en el portaobjetos. HIPÓTESIS/OBJETIVOS: comparar el rendimiento de organismos entre una técnica de recolección citológica nueva y dos estándar mediante la evaluación de recuentos de bacterias y levadura Malassezia. ANIMALES: Treinta perros de propietarios particulares diagnosticados con dermatitis atópica y lesiones compatibles con pioderma y / o dermatitis por Malassezia. MATERIALES Y MÉTODOS: en un estudio comparativo prospectivo y ciego, se tomaron muestras de las lesiones dermatológicas de cada perro utilizando metodologías de preparación de frotis de impresión, tiras de cinta y suspensión. Diez campos de retícula aleatorios por lesión, que representan un área total de 6,25 × 10-3 mm2 (equivalente a ~ 5% de un campo de campo típico × 40), se evaluaron mediante microscopía óptica para cada método citológico. Los organismos bacterianos y Malassezia se midieron como recuentos / muestra. La preparación de la suspensión se comparó con cada una de las metodologías estándar por separado utilizando pruebas t de Student pareadas. RESULTADOS: la preparación de la suspensión demostró ser más sensible que las técnicas estándar de referencia en la detección de bacterias, con diferencias medias de 12,7 y 13,5 bacterias adicionales por muestra citológica, en comparación con las preparaciones de impresión y cinta adhesiva, respectivamente. La preparación de la suspensión no difirió significativamente en la detección de organismos de Malassezia en comparación con la preparación de frotis de impresión. Se demostró que la preparación en cinta adhesiva es más sensible que la preparación en suspensión para la detección de organismos de Malassezia, encontrando una diferencia media de 0,22 organismos más por muestra. CONCLUSIÓN: la preparación de suspensión presenta ventajas sobre las técnicas estándar de referencia en la detección de bacterias lo que puede ayudar a controlar la pioderma canina de manera más adecuada. Realizar una preparación de suspensión en casos de sospecha de pioderma canina podría considerarse como una alternativa a las técnicas estándar de referencia.Die zytologische Untersuchung der Haut ist in der Dermatologie eine wichtige diagnostische Technik zur Krankheitsdiagnose, sowie für Monitoring und Behandlung. Nach Erfassung der Anamnese und einer klinischen Untersuchung ist die zytologische Evaluierung oft der nächste Schritt. Abklatschpräparate und Klebestreifenpräparate sind der Goldene Standard der zytologischen Verfahren. Diese Studie stellt eine neue zytologische Methode vor, ein Suspensionspräparat, in dem Debris von der Hautoberfläche gesammelt und in warmem sterilem Wasser mazeriert und auf einem Objektträger getrocknet wird.Ein Vergleich der Organismen, die durch die neue Technik gewonnen werden können mit zwei Standard zytologischen Sammeltechniken, durch eine Evaluierung der Anzahl an Bakterien und Malassezien Hefen.Dreißig Hunde in Privatbesitz mit atopischer Dermatitis und Hautveränderungen, die mit Pyodermie und/oder Malassezia Dermatitis übereinstimmten.In einer prospektiven, geblindeten Vergleichsstudie wurden von allen dermatologischen Veränderungen eines jeden Hundes mittels Ablatschpräparat, Klebestreifen- und Suspensionspräparat Proben genommen. Zehn Retikelfelder wurden pro Veränderung zufällig ausgewählt, was einer Gesamtfläche von 6,25 x 10-3 mm2 (entsprechend ~5% eines typischen x40 Feldes) entspricht und mittels Lichtmikroskop für jede zytologische Methode evaluiert. Bakterien und Malassezia Organismen wurden als Zahl/Probe gemessen. Das Suspensionspräparat wurde mit jeder Standardmethode separat mittels gepaartem Student t-Test verglichen.Es konnte gezeigt werden, dass das Suspensionspräparat sensibler als die Gold Standard Techniken beim Auffinden von Bakterien ist, mit durchschnittlichen Unterschieden von 12,7 und 13,5 zusätzlichen Bakterien pro Zytologieprobe im Vergleich zum Abklatsch- bzw Klebestreifenpräparat. Die Suspensionslösung unterschied sich beim Erkennen von Malassezia Organismen im Vergleich zum Abklatschpräparat nicht signifikant. Es konnte gezeigt werden, dass das Klebestreifenpräparat beim Erkennen von Malassezia Organismen sensibler ist als das Suspensionspräparat, da durchschnittlich um 0,22 mehr Organismen pro Probe gefunden wurden.Suspensionpräparate sind vorteilhaft im Vergleich zu den Gold Standard Techniken bei der Erkennung von Bakterien, was beim Management einer canine Pyodermie entsprechend besser helfen könnte. Die Durchführung eines Suspensionspräparates in Verdachtsfällen von caniner Pyodermie sollte als Alternative zu den Gold Standard Techniken in Betracht gezogen werden.背景: 皮膚の細胞診は，皮膚科において疾患の診断，経過観察，治療のための重要な診断技術である。押捺塗抹標本およびテープストリップ標本は、細胞診のゴールドスタンダードである。本研究では、皮膚表面から採取した残渣を温かい滅菌水に浸し、スライド上で乾燥させるという新しい細胞学的手法であるスラリー調製法を紹介する。 仮説/目的: 本研究の目的は、細菌およびマラセチア酵母数を評価することにより、新規の細胞学的採取法および2つの標準的な細胞学的採取法間で生物学的収量を比較することであった。 被検動物: アトピー性皮膚炎と診断され、膿皮症および／またはマラセチア皮膚炎と一致する病変を有するオーナー所有犬30頭。 材料と方法: 回顧的盲検比較研究において、各犬の皮膚病変は押捺塗抹法、テープストリップ法およびスラリー調製法を用いてサンプル化された。病変部ごとにランダムに10個のレチクルフィールド（総面積6.25×10-3 mm2 （一般的な×40フィールドの約5％に相当））を採取し、各細胞学的手法について光学顕微鏡で評価した。細菌およびマラセチアは数／サンプルで測定した。スラリー調製法は、paired Student’s t-testsを用いて、各標準的な方法と別々に比較した。 結果: スラリー法は、押捺法およびテープストリップ法と比較して、細胞学的サンプルあたり平均12.7および13.5の追加の細菌を検出し、ゴールドスタンダード法よりも高感度であることが実証された。マラセチアの検出では，スラリー法は押捺塗抹法と比較して有意な差はなかった。テープストリップ法はスラリー法よりもマラセチアの検出感度が高いことが実証され，サンプルあたり平均0.22個の酵母菌が検出された。 結論: スラリー調製法は、細菌の検出においてゴールドスタンダード手法よりも優れており、犬の膿皮症をより適切に管理するのに役立つ。犬の膿皮症が疑われる症例にスラリー調製法を行うことは、ゴールドスタンダード技術の代替として考慮されるべきである。.背景: 皮肤的细胞学检查是皮肤病诊断、监测和治疗的重要诊断技术。压片和胶带黏贴是细胞学技术的金标准。本研究介绍了一种新的细胞学方法--浆液制备，将从皮肤表面收集的碎屑浸泡在温热的无菌水中，并在载玻片上干燥。 假设/目的: 通过评价细菌和马拉色菌的数量，比较新型技术和两种标准细胞学采集技术之间的微生物数量。 动物: 被诊断为特应性皮炎的30只宠物犬，同时有脓皮病和/或马拉色菌性皮炎的病变。 材料和方法: 在一项前瞻性、设盲比较研究中，使用压片、胶带黏贴和浆液制备方法对每只犬的皮肤病变进行采样。对于每种细胞学方法，通过光学显微镜评价每个病变的10个随机角质层视野，总面积6.25 × 10-3 mm2 （相当于典型×40视野的~5%）。细菌和马拉色菌计数/样本测量。使用一组进行检验以比较浆液制备与每种标准方法进行比较。 结果: 经证明，浆液制备物在检测细菌方面比金标准技术更灵敏，与压片和胶带制备相比，每个细胞学样本的平均额外细菌差异分别为12.7和13.5。与压片制备物相比，浆液制备物在检测马拉色菌微生物方面无显著差异。经证明，醋酸胶带在检测马拉色菌微生物方面比浆液制剂更灵敏，每份样品平均多0.22个微生物。 结论: 与金标准技术相比，浆液制备在检测细菌方面具有优势，有助于更好地管理犬脓皮病。在疑似犬脓皮病的情况下进行浆液制备可视为金标准技术的替代方法。.O exame citológico da pele é um importante método diagnóstico em dermatologia para o diagnóstico, acompanhamento e tratamento de doenças. O imprint e a citologia por fita adesiva são técnicas citológicas padrão-ouro. Este estudo apresenta um novo método citológico, a preparação em pasta, técnica em que os debris coletados da superfície da pele são macerados em água estéril morna, aplicados e secos na lâmina. HIPÓTESE/OBJETIVOS: Comparar a concentração de microrganismos entre uma técnica de coleta citológica nova e duas padrão avaliando contagens de bactérias e Malassezia.Trinta cães de clientes com diagnóstico de dermatite atópica e lesões consistentes com piodermite e/ou malasseziose. MATERIAIS E MÉTODOS: Em um estudo cego comparativo prospectivo, as lesões dermatológicas de cada cão foram amostradas utilizando o imprint, fita adesiva e preparação em pasta. Avaliou-se dez campos reticulares aleatórios por lesão, representando uma área total de 6,25×10-3 mm2 (equivalente a ~5% de um campo de campo típico ×40) por microscopia ótica para cada método citológico. As células bacterianas e Malassezia foram avaliadas por contagens/amostra. A preparação em pasta foi comparada com cada um dos métodos padrão separadamente usando testes t de Student emparelhados.A preparação em pasta demonstrou ser mais sensível do que as técnicas padrão-ouro na detecção de bactérias, com diferenças médias de 12,7 e 13,5 bactérias adicionais por amostra citológica, em comparação com o imprint e a fita adesiva, respectivamente. A preparação em pasta não diferiu significativamente na detecção de Malassezia em comparação com o imprint. A fita adesiva demonstrou ser mais sensível do que a preparação em pasta na detecção de Malassezia, apresentando uma diferença média de 0,22 mais organismos por amostra. CONCLUSÃO: A preparação em pasta apresenta vantagens sobre as técnicas padrão-ouro na detecção de bactérias que podem auxiliar no manejo mais adequado da piodermite canina. A preparação em pasta em casos suspeitos de piodermite canina pode ser considerada uma alternativa às técnicas padrão-ouro.