亲爱的研友该休息了!由于当前在线用户较少,发布求助请尽量完整的填写文献信息,科研通机器人24小时在线,伴您度过漫漫科研夜!身体可是革命的本钱,早点休息,好梦!

Non-amplification nucleic acid detection with thio-NAD cycling

核酸 NAD+激酶 互补DNA DNA 生物化学 寡核苷酸 基因 结核分枝杆菌 杂交探针 聚合酶链反应 核酸热力学 质粒 分子生物学 生物 核糖核酸 肺结核 医学 病理
作者
Sou Yamura,Naoki Kawada,Shinnosuke Yamakado,Yuta Kyosei,Shigeo Watabe,Teizo Yoshimura,Yoshiro Murase,Satoshi Mitarai,Etsuro Ito
出处
期刊:Journal of Microbiological Methods [Elsevier]
卷期号:204: 106647-106647 被引量:2
标识
DOI:10.1016/j.mimet.2022.106647
摘要

The PCR technique is indispensable in biology and medicine, but some difficulties are associated with its use, including false positive or false negative amplifications. To avoid these issues, a non-amplification nucleic acid detection protocol is needed. In the present study, we propose a method in which nucleic-acid probe hybridization is combined with thio-NAD cycling to detect nucleic acids without amplification. We report our application of this method for the detection of the gene of MPT64 in Mycobacterium tuberculosis. Two different cDNA probes targeted the mpt64 gene: the first probe was used to immobilize the mpt64 gene, and the second probe, linked with alkaline phosphatase (ALP), was hybridized to a target sequence in the mpt64 gene. A substrate was then hydrolyzed by ALP, and a cycling reaction was conducted by a dehydrogenase with its co-factors (thio-NAD and NADH). The single-stranded DNA, double-stranded DNA, plasmid DNA for the mpt64 gene, and whole genome of M. tuberculosis var. BCG were detected at the level of 105–106 copies/assay, whereas the non-tuberculosis mycobacteria (e.g., M. avium, M. intracellulare, M. kansasii, and M. abscessus) were below the limits of detection. The present method enables us to avoid the errors inherent in nucleic acid amplification methods.
最长约 10秒,即可获得该文献文件

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
更新
大幅提高文件上传限制,最高150M (2024-4-1)

科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
受伤翠容发布了新的文献求助10
2秒前
6秒前
受伤翠容完成签到,获得积分20
8秒前
平常的凡白完成签到 ,获得积分10
12秒前
dream177777完成签到 ,获得积分10
15秒前
monicaj完成签到 ,获得积分10
17秒前
cheese完成签到 ,获得积分10
24秒前
SHUTUP发布了新的文献求助10
24秒前
577kkmm完成签到 ,获得积分10
25秒前
墨与白完成签到 ,获得积分10
31秒前
唐汉发布了新的文献求助10
36秒前
活泼的匕完成签到 ,获得积分10
36秒前
58秒前
1分钟前
1分钟前
兰兰发布了新的文献求助10
1分钟前
1分钟前
orixero应助兰兰采纳,获得10
1分钟前
1分钟前
吕懿发布了新的文献求助10
1分钟前
研友_VZG7GZ应助577kkmm采纳,获得10
1分钟前
情怀应助吕懿采纳,获得10
1分钟前
高兴的店员完成签到,获得积分10
1分钟前
蓝色的纪念完成签到,获得积分10
1分钟前
横扫完成签到 ,获得积分10
1分钟前
damie完成签到 ,获得积分10
1分钟前
1分钟前
神凰完成签到,获得积分10
1分钟前
升升升呀应助lenon采纳,获得10
1分钟前
1分钟前
田様应助唐汉采纳,获得10
2分钟前
DrY发布了新的文献求助30
2分钟前
sino-ft完成签到,获得积分10
2分钟前
2分钟前
2分钟前
eri发布了新的文献求助10
2分钟前
2分钟前
2分钟前
Andy发布了新的文献求助10
2分钟前
liu576454693发布了新的文献求助10
2分钟前
高分求助中
Un calendrier babylonien des travaux, des signes et des mois: Séries iqqur îpuš 1036
Sustainable Land Management: Strategies to Cope with the Marginalisation of Agriculture 1000
Corrosion and Oxygen Control 600
Heterocyclic Stilbene and Bibenzyl Derivatives in Liverworts: Distribution, Structures, Total Synthesis and Biological Activity 500
重庆市新能源汽车产业大数据招商指南(两链两图两池两库两平台两清单两报告) 400
Division and square root. Digit-recurrence algorithms and implementations 400
行動データの計算論モデリング 強化学習モデルを例として 400
热门求助领域 (近24小时)
化学 材料科学 医学 生物 有机化学 工程类 生物化学 纳米技术 物理 内科学 计算机科学 化学工程 复合材料 遗传学 基因 物理化学 催化作用 电极 光电子学 量子力学
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 2545278
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 2175612
关于积分的说明 5600084
捐赠科研通 1896314
什么是DOI,文献DOI怎么找? 946176
版权声明 565334
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 503541