[Co-expression, purification and bioassay of three avian viral antigens].

传染性法氏囊病 污渍 分子生物学 病毒 生物 抗原 抗原性 蛋白质亚单位 病毒学 大肠杆菌 重组DNA 基因 生物化学 遗传学 毒力
作者
Suling Zhang,Mengyue Wang,Yanwei Wang,Peng Wu,Wenqiang Pang,Kegong Tian
出处
期刊:PubMed [National Institutes of Health]
卷期号:36 (10): 2066-2075
标识
DOI:10.13345/j.cjb.200057
摘要

To achieve uniform soluble expression of multiple proteins in the same Escherichia coli strain, and simplify the process steps of antigen production in genetic engineering subunit multivalent vaccine, we co-expressed three avian virus proteins including the fowl adenovirus serotype 4 (FAdV-4) Fiber-2 protein, infectious bursal disease virus (IBDV) VP2 protein and egg-drop syndrome virus (EDSV) Fiber protein in E. coli BL21(DE3) cells after optimization of gene codon, promoter, and tandem expression order. The purified proteins were analyzed by Western blotting and agar gel precipitation (AGP). The content of the three proteins were well-proportioned after co-expression and the purity of the purified proteins were more than 80%. Western blotting analysis and AGP experiment results show that all the three co-expression proteins had immunoreactivity and antigenicity. It is the first time to achieve the three different avian virus antigens co-expression and co-purification, which simplified the process of antigen production and laid a foundation for the development of genetic engineering subunit multivalent vaccine.

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