СИНТЕЗ И ЛОКАЛИЗАЦИЯ L-ЛАКТАТОКСИДАЗЫ У ДРОЖЖЕЙ YARROWIA LIPOLYTICA

Изучены условия синтеза L-лактатоксидазы дрожжами Yarrowia lipolytica. Показано, что синтез фермента происходит в процессе роста на L-лактате (в экспоненциальной фазе роста). Показано также, что L-лактатоксидаза может синтезироваться дрожжами при росте на глюкозе, но после адаптации к стрессовым условиям (окислительный или тепловой стрессы) или в стационарной фазе роста (при исчерпании глюкозы). Для клеток, растущих на L-лактате, показан высокий уровень антиоксидантных ферментов (каталазы, супероксидисмутазы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и глутатионредуктазы), превышающий таковой у клеток, растущих на глюкозе. Показано также, что ультраструктура клеток, растущих на L-лактате, аналогична ультраструктуре клеток, растущих на глюкозе и адаптированных к различным стрессовым условиям: отмечено увеличение размеров митохондрий, повышение численности и размеров пероксисом, появление липидных и полифосфатных гранул. С целью определения внутриклеточной локализации L-лактатоксидазы клетки были разрушены с применением комплекса литических ферментов желудочного сока виноградной улитки. После центрифугирования гомогената в градиенте перкола были получены очищенные фракции нативных митохондрий и пероксисом. Показано, что L-лактатоксидаза локализована в пероксисомах.