Using the Gene Pulser MXcell Electroporation System to Transfect Primary Cells with High Efficiency

电穿孔 转染 反应杯 细胞生物学 原电池 基因传递 生物 分子生物学 细胞培养 基因 遗传学 物理 光学
作者
Adam M. McCoy,Michelle Collins,Luis A. Ugozzoli
出处
期刊:Journal of Visualized Experiments [MyJOVE]
卷期号: (35)
标识
DOI:10.3791/1662-v
摘要

It is becoming increasingly apparent that electroporation is the most effective way to introduce plasmid DNA or siRNA into primary cells. The Gene Pulser MXcell electroporation system and Gene Pulser electroporation buffer (Bio-Rad) were specifically developed to easily transfect nucleic acids into mammalian cells and difficult-to-transfect cells, such as primary and stem cells. We will demonstrate how to perform a simple experiment to quickly identify the best electroporation conditions. We will demonstrate how to run several samples through a range of electroporation conditions so that an experiment can be conducted at the same time as optimization is performed. We will also show how optimal conditions identified using 96-well electroporation plates can be used with standard electroporation cuvettes, facilitating the switch from electroporation plates to electroporation cuvettes while maintaining the same electroporation efficiency. In the video, we will also discuss some of the key factors that can lead to the success or failure of electroporation experiments.
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