Blastomere fusion of mouse 2-cell embryos using polyethylene glycol.

ポリエチレングリコール(PEG)を用いて,未受精卵(半数体)同士を融合して2倍体卵を作製してクローン動物を得ることを最終的な目的に,本実験ではマウス2細胞期胚の割球融合を指標にPEGの処置条件を検討した。得られた結果の概要は次の通りである。1.PEG処置を施す胚の透明帯は除去あるいは傷つけなくても,それらの処置を施した場合と同程度に割球の融合が観察された。2.2細胞期胚の割球が融合し,融合胚が胚盤胞へ発育する割合は,PEG製剤の種類および濃度によって相違し,35%までの濃度ではいずれのPEG製剤でも融合はみられなかった。供試した4種類のPEG製剤のうち,分子量1,000のシグマ社製および和光純薬製PEGで融合率および融合胚の発育率が高かった。3.融合率が最も高いPEGの処置時間は,40~50%PEGの場合120秒間であった。PEGの処置時間が長くなるに従って,とくに高濃度区で融合胚の発育が阻害された。4.PEG液にDMSOを添加しても,融合率の向上はみられなかった。以上の結果より,マウス2細胞期胚を45%PEGで90~120秒間あるいは50%PEGで90秒間処置すれぽ,処置胚のうち23%~30%が融合後胚盤胞へ発育することが判明した。