A CRISPR-based assay for the detection of opportunistic infections post-transplantation and for the monitoring of transplant rejection

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作者
Michael M. Kaminski,Miguel A. Alcantar,Isadora Tadeval Lape,Robert Greensmith,Allison C. Huske,Jacqueline A. Valeri,Francisco M. Marty,Verena Klämbt,Jamil R. Azzi,Enver Akalin,Leonardo V. Riella,James J. Collins
出处
期刊:Nature Biomedical Engineering [Nature Portfolio]
卷期号:4 (6): 601-609 被引量:126
标识
DOI:10.1038/s41551-020-0546-5
摘要

In organ transplantation, infection and rejection are major causes of graft loss. They are linked by the net state of immunosuppression. To diagnose and treat these conditions earlier, and to improve long-term patient outcomes, refined strategies for the monitoring of patients after graft transplantation are needed. Here, we show that a fast and inexpensive assay based on CRISPR–Cas13 accurately detects BK polyomavirus DNA and cytomegalovirus DNA from patient-derived blood and urine samples, as well as CXCL9 messenger RNA (a marker of graft rejection) at elevated levels in urine samples from patients experiencing acute kidney transplant rejection. The assay, which we adapted for lateral-flow readout, enables—via simple visualization—the post-transplantation monitoring of common opportunistic viral infections and of graft rejection, and should facilitate point-of-care post-transplantation monitoring. A fast and inexpensive point-of-care assay based on CRISPR–Cas13 accurately detects the DNA of opportunistic viruses in blood and urine samples as well as an mRNA marker of renal transplant rejection in urine samples.
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