A Fluorescent Lectin Array Using Supramolecular Hydrogel for Simple Detection and Pattern Profiling for Various Glycoconjugates

化学 糖复合物 凝集素 荧光 超分子化学 分子识别 生物物理学 组合化学 色谱法 生物化学 分子 有机化学 物理 量子力学 生物
作者
Yoichiro Koshi,Eiji Nakata,Hiroki Yamane,Itaru Hamachi
出处
期刊:Journal of the American Chemical Society [American Chemical Society]
卷期号:128 (32): 10413-10422 被引量:140
标识
DOI:10.1021/ja0613963
摘要

Because sugar and its derivatives play important roles in various biological phenomena, the rapid and high-throughput analysis of various glycoconjugates is keenly desirable. We describe herein the construction of a novel fluorescent lectin array for saccharide detection using a supramolecular hydrogel matrix. In this array, the fluorescent lectins were noncovalently fixed under semi-wet conditions to suppress the protein denaturation. It is demonstrated by fluorescence titration and fluorescence lifetime experiments that the immobilized lectins act as a molecular recognition scaffold in the hydrogel matrix, similar to that in aqueous solution. That is, a bimolecular fluorescence quenching and recovery (BFQR) method can successfully operate under both conditions. This enables one to fluorescently read-out a series of saccharides on the basis of the recognition selectivity and affinity of the immobilized lectins without tedious washing processes and without labeling the target saccharides. Simple and high-throughput sensing and profiling were carried out using the present lectin array for diverse glycoconjugates, which not only included a simple glucose, but also oligosaccharides, and glycoproteins, and, furthermore, the pattern recognition and profiling of several types of cell lysates were also accomplished.
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