Investigation of Petal Senescence by TRV-Mediated Virus-Induced Gene Silencing in Rose

烟草响尾蛇病毒 基因 生物 突变体 绿色荧光蛋白 花瓣 基因沉默 遗传学 反向遗传学 病毒 植物
作者
Chenxia Cheng,Junping Gao,Nan Ma
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:: 49-63 被引量:14
标识
DOI:10.1007/978-1-4939-7672-0_4
摘要

The classic reverse genetic screening, such as EMS-induced or T-DNA-mediated mutation, is a powerful tool to identify senescence-related genes in many model plants. For most non-model plants, however, this strategy is hard to achieve. Even for model plants, construction of a mutant library is usually labor and time-consuming. Virus-induced gene silencing (VIGS) provides an alternative to characterize gene function in a wide spectrum of plants through transient gene expression. To date, more than a dozen of VIGS vector systems have been developed from different RNA and DNA viruses, while Tobacco rattle virus (TRV) system might be one of the most used due to its wide host range and ease of use. Here, we describe a modified TRV vector, TRV-GFP, in which a green fluorescent protein (GFP) is fused to 3′-end of the coat protein (CP) gene in the TRV2 vector. Since the GFP-tagged CP protein could be traced under UV light in planta, identification of TRV-GFP-infected plants is easy. Application of this system in identifying genes regulating petal senescence in rose is described.
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