Vero—E6细胞培养中汉坦病毒抗原流式细胞术检测方法的建立及与ELISA、IFA方法的比较

目的建立运用流式细胞仪检测Vero-E6细胞中汉坦病毒抗原的方法，并与间接免疫荧光法（IFA）、ELISA进行比较。方法将汉坦病毒感染10d的Vero-E6细胞以A35单克隆抗体为一抗，FITC标记羊抗鼠抗体为二抗，采用流式细胞仪检测表达抗原的细胞，并将病毒不同感染天数及病毒不同载量感染情况下的抗原检测结果与IFA、双抗体夹心法ELISA进行比较。结果流式细胞术在感染后的第2天可检出的阳性细胞数为2．60％，其最低检出的病毒感染载量为50pfu／ml；而IFA和双抗体夹心法ELISA则分别在感染后的第3天、第2天能检出抗原，最低检出的病毒感染载量均为50pfu／ml。结论流式细胞术检测法作为一种检测细胞内汉坦病毒抗原的方法具有简便、灵敏快速，与ELISA、IFA方法比较，可更直接准确定量。