Method for efficient soluble expression and purification of recombinant hyperactive Tn5 transposase

重组DNA DNA 核酸 生物 DNA测序 分子生物学 计算生物学 转座酶 基因 转座因子 化学 遗传学 基因组
作者
Tongtong Xu,Minqin Xiao,Lin Yu
出处
期刊:Protein Expression and Purification [Elsevier]
卷期号:183: 105866-105866 被引量:9
标识
DOI:10.1016/j.pep.2021.105866
摘要

Efficient preparation of libraries is the key step of next-generation sequencing (NGS) methods. Tn5 transposase enables simple, robust and highly efficient tagmentation-based library construction. Here, we report a simple and reliable expression and purification strategy based on fusing Tn5 to the small B1 immunoglobulin binding domain of Streptococcal protein G (GB1) and high affinity 10× His tag. The purified recombinant Tn5 showed high DNA tagmentation activity and ultra-low nucleic acid contamination. This method greatly cuts the costs of Tn5-based NGS library construction and is beneficial to the development of new NGS methods.
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