Escherichia coli Nissle 1917 induziert die Apoptose von γδ T-Zellen über Fas-L und Caspase-abhängige Mechanismen

Einleitung: γδ T-Zellen erkennen pathogen-assoziierte molekulare Muster mikrobieller Antigene direkt ohne eine vorherige Präsentation durch antigenpräsentierende Zellen. Sie spielen somit eine entscheidende Rolle in der angeborenen Immunabwehr. Wir konnten kürzlich zeigen, dass E.coli Nissle 1917 (EcN) die Zellzyklusprogression von T-Zellen über TLR-abhängige Signalwege inhibiert. γδ T-Zellen exprimieren TLRs, wir untersuchten daher den Einfluss von EcN auf die Apoptose von γδ T-Zellen. Methodik: γδ T-Zellen wurden von peripheren Blut T-Lymphozyten negativ magnetisch isoliert, mit IPP und IL-2 stimuliert und für 72h mit und ohne 25% steril filtriertem EcN Überstand kultiviert. Durchflusszytometrisch wurden Apoptose (Annexin V), Nekrose (PI), Fas, Fas-L, und die TNF-α Rezeptorenexpression gemessen. Ergebnisse: EcN induziert signifikant die Apoptose von γδ T-Zellen (Anstieg um 25±4,2%), nicht aber von αβ T-Zellen (Inhibition um 3±1,1%). In γδ T-Zellen steigert EcN die Expression von Fas-L (73±3,4% Anstieg), TNF-α Rezeptor-1 (23±4,1% Anstieg), hemmt die Expression des TNF-α-Rezeptor 2 um 48±2,7%, während die Fas Expression unverändert blieb. Die EcN induzierte Apoptose von γδ T-Zellen wurde signifikant durch die Caspase-3, -8, -9, Inhibitoren, zVAD und blockierende anti-Fas-L Antikörper inhibiert. Zusammenfassung: Unsere Untersuchungen zeigen erstmalig, dass EcN selektiv die Apoptose von γδ T-Zellen induziert und somit distinkt die Verbindung zwischen angeborenen und erworbenen Immunsystem beeinflusst. Dieser pro-apoptotische Effekt wird über Fas-L und Caspasenabhängige Signalwege vermittelt. Chronisch entzündliche Darmerkrankungen zeichnen sich durch eine unkontrollierte Immunantwort gegen die eigene Darmflora aus, bei der eine Aktivierung von γδ T-Zellen eine entscheidende Rolle in der Erkennung von mikrobiellen Antigenen spielt. Mit der Induktion der γδ T-Zellapoptose durch EcN kann der positive Einfluss des Probiotikums auf die intestinale mukosale Entzündungsreaktionen weiter erklärt werden.