БИОСИНТЕЗ ИЗОЛИМОННОЙ КИСЛОТЫ ДРОЖЖАМИ YARROWIA LIPOLYTICA И ЕГО РЕГУЛЯЦИЯ

Изучен биосинтез изолимонной кислоты из рапсового масла дрожжами Yarrowia lipolytica и его регуляция. Установлена принципиальная возможность направленного биосинтеза дрожжами Y. lipolytica изолимонной кислоты с минимальным содержанием побочного продукта – лимонной кислоты на среде, содержащей рапсовое масло. В результате УФ-облучения и обработки N-метил-N-нитро-N-нитрозогуанидином (НГ) природных штаммов Y. lipolytica и последующей селекции на средах с ацетатом и изоцитратом получен мутант Y. lipolytica УФ/НГ, который синтезировал изоцитрат и цитрат в соотношении 2.7 : 1, в отличие от исходного штамма, у которого это соотношение – 1 : 1. Показано, что ингибирование изоцитрат-лиазы – ключевого фермента метаболизма изолимонной кислоты, итаконовой кислотой приводило к увеличению синтеза изоцитрата до соотношения изоцитрат : цитрат 6 : 1. При выращивании мутанта Y. lipolytica УФ/НГ в полупромышленном ферментере в присутствии итаконовой кислоты синтезировалось 88.7 г/л изолимонной кислоты с выходом 90%.