Silencing Specific Genes in Plants Using Virus-Induced Gene Silencing (VIGS) Vectors

烟草 基因沉默 生物 功能基因组学 基因 载体(分子生物学) 烟草响尾蛇病毒 遗传学 反向遗传学 克隆(编程) 病毒载体 基因组 计算生物学 基因组学 重组DNA 计算机科学 程序设计语言
作者
Tao Zhou,Laihua Dong,Tong Jiang,Zaifeng Fan
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:2400: 149-161 被引量:18
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-1835-6_15
摘要

As an efficient tool for functional genomics, VIGS (virus-induced gene silencing) has been widely used in reverse and forward genetics to identify genes involved in various biology processes in many plant species. Up to now, at least 50 VIGS vectors based on RNA viruses, DNA viruses or satellites have been developed for either dicots or monocots or both. Silencing specific genes using VIGS vector involves five major steps including, first, choosing an appropriate VIGS vector for the plant; second, selecting a fragment of targeted host gene; third, cloning the fragment into viral VIGS vector; forth, inoculating and infecting the appropriate plant; and fifth, quantifying silencing effects including recording silencing phenotypes and determining silencing efficiency of the target gene. In this chapter, we introduce these steps for VIGS assay in dicots and monocots, by taking a cucumber mosaic virus-based VIGS vector for Nicotiana benthamiana and maize plants as an example. Moreover, we list available VIGS vectors for monocots.
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