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Dielectrophoretic isolation and detection of cfc‐DNA nanoparticulate biomarkers and virus from blood

DNA 荧光 分子生物学 核酸 病毒 化学 全血 生物 病毒学 生物化学 免疫学 量子力学 物理
作者
Avery Sonnenberg,Jennifer Y. Marciniak,James P. McCanna,Rajaram Krishnan,Laura Z. Rassenti,Thomas J. Kipps,Michael J. Heller
出处
期刊:Electrophoresis [Wiley]
卷期号:34 (7): 1076-1084 被引量:77
标识
DOI:10.1002/elps.201200444
摘要

Dielectrophoretic (DEP) microarray devices allow important cellular nanoparticulate biomarkers and virus to be rapidly isolated, concentrated, and detected directly from clinical and biological samples. A variety of submicron nanoparticulate entities including cell free circulating (cfc) DNA , mitochondria, and virus can be isolated into DEP high‐field areas on microelectrodes, while blood cells and other micron‐size entities become isolated into DEP low‐field areas between the microelectrodes. The nanoparticulate entities are held in the DEP high‐field areas while cells are washed away along with proteins and other small molecules that are not affected by the DEP electric fields. DEP carried out on 20 μL of whole blood obtained from chronic lymphocytic leukemia patients showed a considerable amount of SYBR G reen stained DNA fluorescent material concentrated in the DEP high‐field regions. Whole blood obtained from healthy individuals showed little or no fluorescent DNA materials in the DEP high‐field regions. Fluorescent T 7 bacteriophage virus could be isolated directly from blood samples, and fluorescently stained mitochondria could be isolated from biological buffer samples. Using newer DEP microarray devices, high‐molecular‐weight DNA could be isolated from serum and detected at levels as low as 8–16 ng/mL.
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