丹皮酚对MPP + 诱导的SH-SY5Y细胞线粒体自噬和死亡的保护作用

目的研究线粒体自噬在MPP+损伤SH-SY5Y细胞中的发生及丹皮酚的干预作用。 方法以1 mmol·L-1 MPP+诱导SH-SY5Y细胞损伤建立帕金森病模型。采用MTT和LDH法分别检测不同浓度的丹皮酚对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞存活率和损伤度的影响；MDC染色荧光显微镜下检测自噬空泡聚集；流式细胞术定量分析细胞内酸性自噬泡的形成；透射电镜观察线粒体自噬现象；激光共聚焦检测溶酶体和线粒体共定位；Western blot检测线粒体自噬相关蛋白parkin、LC3和Beclin-1的表达变化。 结果在1~100 μmol·L-1浓度范围内，预先加入丹皮酚能拮抗MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤，并呈一定的量效关系；SH-SY5Y细胞经MPP+处理24 h，观察到自噬现象，出现自噬空泡增多，自噬水平增加，并存在较多的线粒体与溶酶体共定位的现象，LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达增加，parkin表达降低。预先加入丹皮酚后能逆转这些现象。 结论丹皮酚抑制MPP+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体自噬的发生，阻止神经细胞的死亡。