Rapid Purification of dsRNA Using Micro-Spin Cellulose Column

RNA沉默 溶解 核糖核酸 核酸 纤维素 生物 色谱法 病毒 病毒学 化学 生物化学 RNA干扰 基因
作者
Yuting Wang,Ziyi Wang,Xiaoyun Wu
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:: 19-25
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-3702-9_4
摘要

Double-stranded RNA (dsRNA) is the replication intermediates of all RNA viruses. Purification and analysis of the profile and sequence of dsRNA is vital in virus diagnoses and/or characterization. Cellulose is one of the common materials used for isolation of dsRNA. Cellulose specifically binds dsRNA fraction under 15% ethanol concentration, which allows to isolate dsRNA from total nucleic acid solution or cell lysate. Here, we describe a rapid and reliable method for purifying dsRNA using a home-made micro-spin cellulose column from the cell lysate of virus-infected plant tissue. This labor-saving and rapid method enables routinely high-throughput isolation and analysis of dsRNA in plant or fungi samples.
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