Chromatin-Independent Nuclear Envelope Assembly Induced by Ran GTPase in Xenopus Egg Extracts

爪蟾 鸟嘌呤核苷酸交换因子 鸟苷 细胞生物学 染色质 GTP' GTP酶 核孔 细胞质 小型GTPase 鸟苷二磷酸 有丝分裂 细胞核 生物物理学 生物 鸟苷三磷酸 DNA 核运输 生物化学 化学 信号转导 基因
作者
Chuanmao Zhang,Paul R. Clarke
出处
期刊:Science [American Association for the Advancement of Science (AAAS)]
卷期号:288 (5470): 1429-1432 被引量:202
标识
DOI:10.1126/science.288.5470.1429
摘要

The nuclear envelope (NE) forms a controlled boundary between the cytoplasm and the nucleus of eukaryotic cells. To facilitate investigation of mechanisms controlling NE assembly, we developed a cell-free system made from Xenopus laevis eggs to study the process in the absence of chromatin. NEs incorporating nuclear pores were assembled around beads coated with the guanosine triphosphatase Ran, forming pseudo-nuclei that actively imported nuclear proteins. NE assembly required the cycling of guanine nucleotides on Ran and was promoted by RCC1, a nucleotide exchange factor recruited to beads by Ran–guanosine diphosphate (Ran-GDP). Thus, concentration of Ran-GDP followed by generation of Ran-GTP is sufficient to induce NE assembly.
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