Selection and Characterization of Human Anti-MAGE-A1 scFv and Immunotoxin

免疫毒素 单链可变片段 噬菌体展示 抗体 重组DNA 分子生物学 免疫沉淀 化学 免疫印迹 肽库 斑点印迹 亲和层析 人源化抗体 抗原 单克隆抗体 病毒学 酶 生物 生物化学 基因 肽序列 免疫学
作者
Hong Lin,Yuan Mao,Dawei Zhang,Li Hu,Jinrong Qiu,Jin Zhu,Renjie Chen
出处
期刊:Anti-cancer Agents in Medicinal Chemistry [Bentham Science Publishers]
卷期号:13 (8): 1259-1266 被引量:10
标识
DOI:10.2174/18715206113139990134
摘要

Melanoma-associated antigen (MAGE) is expressed on the surface of multiple tumor cell types and is a promising target of biotherapeutic drug delivery via the anti-MAGE-A1 antibody. In this study, a human single-chain variable fragment (scFv) antibody phage library was generated and applied to recombinant MAGE-A1-coated immunotubes by phage display technology. The soluble anti- MAGE-A1 scFv was expressed and purified by immobilized metal-chelated affinity chromatography (IMAC). The anti-MAGE-A1 scFv could bind native MAGE-A1 confirmed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), dot blot, and immunoprecipitation (IP) analysis. The immunotoxin was expressed and purified by IMAC successfully. The results indicated that the human anti-MAGE-A1 immunotoxin could provide a valuable drug for clinic cancer therapy.
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