Recombinant RNA technology: the tRNA scaffold

核糖核酸 转移RNA 重组DNA 生物 计算生物学 大肠杆菌 功能(生物学) 细胞生物学 遗传学 基因
作者
Luc Ponchon,Frédéric Dardel
出处
期刊:Nature Methods [Nature Portfolio]
卷期号:4 (7): 571-576 被引量:228
标识
DOI:10.1038/nmeth1058
摘要

RNA has emerged as a major player in most cellular processes. Understanding these processes at the molecular level requires homogeneous RNA samples for structural, biochemical and pharmacological studies. So far, this has been a bottleneck, as the only methods for producing such pure RNA have been in vitro syntheses. Here we describe a generic approach for expressing and purifying structured RNA in Escherichia coli, using tools that parallel those available for recombinant proteins. Our system is based on a camouflage strategy, the 'tRNA scaffold', in which the recombinant RNA is disguised as a natural RNA and thus hijacks the host machinery, escaping cellular RNases. This opens the way to large-scale structural and molecular investigations of RNA function.
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