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Location, Dissection, and Analysis of the Murine Stellate Ganglion

神经科学 自主神经系统 星状神经节 交感神经系统 医学 原位杂交 去神经支配 病理 生物 细胞生物学 解剖 基因表达 内分泌学 基因 替代医学 血压 心率 生物化学
作者
Katharina Scherschel,Hanna Bräuninger,Klara Glufke,Christiane Jungen,Nikolaj Klöcker,Christian Meyer
出处
期刊:Journal of Visualized Experiments [MyJOVE]
卷期号: (166) 被引量:7
标识
DOI:10.3791/62026
摘要

The autonomic nervous system is a substantial driver of cardiac electrophysiology. Especially the role of its sympathetic branch is an ongoing matter of investigation in the pathophysiology of ventricular arrhythmias (VA). Neurons in the stellate ganglia (SG) – bilateral star-shaped structures of the sympathetic chain – are an important component of the sympathetic infrastructure. The SG are a recognized target for treatment via cardiac sympathetic denervation in patients with therapy-refractory VA. While neuronal remodeling and glial activation in the SG have been described in patients with VA, the underlying cellular and molecular processes that potentially precede the onset of arrhythmia are only insufficiently understood and should be elucidated to improve autonomic modulation. Mouse models allow us to study sympathetic neuronal remodeling, but identification of the murine SG is challenging for the inexperienced investigator. Thus, in-depth cellular and molecular biological studies of the murine SG are lacking for many common cardiac diseases. Here, we describe a basic repertoire for dissecting and studying the SG in adult mice for analyses at RNA level (RNA isolation for gene expression analyses, in situ hybridization), protein level (immunofluorescent whole mount staining), and cellular level (basic morphology, cell size measurement). We present potential solutions to overcome challenges in the preparation technique, and how to improve staining via quenching of autofluorescence. This allows for the visualization of neurons as well as glial cells via established markers in order to determine cell composition and remodeling processes. The methods presented here allow characterizing the SG to gain further information on autonomic dysfunction in mice prone to VA and can be complemented by additional techniques investigating neuronal and glial components of the autonomic nervous system in the heart.
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