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Quantification of viable bacteria in wastewater treatment plants by using propidium monoazide combined with quantitative PCR (PMA-qPCR)

作者
Dan Dan,Li ..,Tiezheng,Tong,Siyu,Zeng,Yiwen,Lin,Shu-xu,Wu,Miao Miao,He
出处
期刊:Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni 卷期号: (2): 299-306
摘要

在废水治疗植物(WWTP ) 的可行细菌的察觉为公共健康是很重要的,因为 WWTP 是有为水运的疾病传播的一个高潜力的媒介。这研究的目的是使用与量的聚合酶链反应(PMA-qPCR ) 相结合有选择地检测并且确定的 propidium monoazide (PMA ) 在在中国的照原尺寸的 WWTP 的可行细菌房间。PMA 在 100 的最后的集中被加到集中的 WWTP 样品 ? mol/L 和样品为 5 min 在黑暗中被孵化,然后分别地为 Escherichia coli 和 Enterococci 与特定的教材在 DNA 抽取和 qPCR 以前为 4 点亮 min。结果证明 PMA 处理在所有 WWTP 样品把超过 99% DNA 从不能生存的房间移开,当在污泥样品的矩阵显著地减少了 PMA 处理的有效性时。比作 qPCR, PMA-qPCR 结果类似、对文化试金获得的那些线性地高度相关,从在 WWTP 样品在场的不能生存的房间显示那 DNA 能被 PMA 处理,和那 PMA-qPCR 消除是为在环境样品的可行细菌的察觉的一个可靠方法。这研究证明 PMA-qPCR 是为在 WWTP 样品的可行细菌的一个快速、选择的察觉方法,并且那 WWTP 在移开可行、不能生存的细菌有明显的功能。结果证明 PMA-qPCR 是以后作为一个互补方法为申请有一个高潜力到标准基于文化的方法的一个有希望的察觉方法。

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