注射用重组艾塞那肽-人血清白蛋白融合蛋白E2HSA对小鼠胰岛 β 细胞功能的保护作用

注射用艾塞那肽-人血清白蛋白融合蛋白（injectable recombinant protein of exendin-4 and human serum albumin，E2HSA）是我国自主研发的一种长效胰高血糖素样肽-1（glucagon-like peptide-1，GLP-1）受体激动剂，目前处于临床研究阶段。本研究在细胞和整体动物水平研究E2HSA对胰岛β细胞的保护作用。在细胞水平，采用小鼠胰岛素瘤细胞株NIT-1考察E2HSA对细胞活力和增殖的影响；采用水溶性胆固醇诱导NIT-1细胞损伤，考察E2HSA对细胞活力和凋亡的影响，并研究其相关作用机制。在整体动物水平，采用四氧嘧啶高血糖小鼠考察长期注射E2HSA对血糖、血胰岛素和胰岛内胰岛素含量的影响。动物实验操作和福利均遵循中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所实验动物伦理与动物福利委员会的规定。结果显示，E2HSA可明显增加NIT-1细胞的活力和掺入的溴脱氧尿嘧啶核苷（bromodeoxyuridine，BrdU）；同时显著增加水溶性胆固醇诱导NIT-1细胞损伤后的细胞活力，减少其凋亡发生率，并增加胞内胰腺-十二指肠同源框1（pancreatic duodenal homeobox-1，PDX-1）和蛋白激酶B（protein kinase B，PKB）蛋白的表达。E2HSA长期注射可明显降低四氧嘧啶小鼠的空腹血糖和非禁食血糖，增加其血清和胰岛内的胰岛素含量。综上，E2HSA可以促进NIT-1细胞增殖，抑制水溶性胆固醇诱导的细胞损伤和凋亡，同时增加四氧嘧啶高血糖小鼠血清和胰岛内的胰岛素水平，提示E2HSA可改善小鼠胰岛β细胞功能。