Expression of human IL-12 in mammalian cell and study on its biological activities

目的 采用遗传基因工程方法获得具有生物活性的人白细胞介素12,探索其治疗肿瘤和慢性肝炎的可行性.方法 采用已克隆的国人IL-12基因序列,利用内部核糖体切入位点(IRES)完成IL-12 P35、P40双亚基共表达载体的构建,通过转染CHO DHFR缺陷细胞,双抗夹心ELISA法筛选阳性克隆,MTX加压扩增,PCR检测其基因整合,T淋巴细胞增殖和诱生γ干扰素实验检测其生物活性.结果 获得了稳定高效表达人IL-12的工程细胞系,表达产物为70×103左右的糖蛋白.结论 本研究得到的基因重组人IL-12具有良好的生物活性,有强的诱导产生γ干扰素的能力和诱导活化T淋巴细胞增殖能力。