The identification of matrix metalloproteinases and their tissue inhibitors in broiler chickens by immunohistochemistry

The aim of this study was to investigate the distribution of matrix metalloproteinase (MMP)-2, MMP-9, tissue inhibitor of matrix metalloproteinase (TIMP)-1 and TIMP-2 using immunohistochemistry in the ascites syndrome of broiler chickens in a salt-induced experimental model. The presence of the enzymes in the lung, heart, liver, kidney and brain was evaluated semi-quantitatively with the streptavidin–biotin–peroxidase (Strep-ABC) method using commercially available primary monoclonal antibodies. Immunostaining of MMP-2 and MMP-9 was more intense and extensive in ascitic broilers than in the controls, although a decrease was seen with increasing age both in normal and ascitic chickens. The presence of MMP-9 enzyme was negatively correlated with the presence of TIMP-1 enzyme. It is suggested that MMP-2 and MMP-9 enzymes might play a role in the permeability increase of vessel walls by the destruction of the basement membranes in the salt-induced experimental ascites syndrome in broiler chickens. Identification des Métalloprotéinases de Matrice et de leurs inhibiteurs de tissu par immunohistochimie, chez le poulet de chair Le but de ce travail a été d'étudier la distribution de la métalloprotéinase de la matrice (MMP)-2, MMP-9, des inhibiteurs de tissu de la métalloprotéinase de la matrice (TIMP)-1 et TIMP-2 par immunohistochimie, dans un modèle expérimental de syndrome ascite induit par le sel chez le poulet de chair. La présence des enzymes dans les poumons, le cœur, le foie, les reins et le cerveau a été évalué de façon semi quantitative avec la méthode streptavidine - biotine - peroxydase (Strep-ABC) utilisant des anticorps monoclonaux disponibles dans le commerce. L'immunocoloration de MMP-2 et - 9 a été plus intense et étendue chez les poulets de chair présentant de l'ascite que chez les témoins, bien qu'une diminution ait été observée avec le vieillissement chez les poulets avec ascites et chez les sujets normaux. La présence de l'enzyme MMP-9 a été corrélée négativement avec la présence de l'enzyme TIMP-1. Il a été suggéré que les enzymes MMP-2 et MMP-9 devaient jouer un rôle dans l'augmentation de la perméabilité des parois des vaisseaux par la destruction des membranes basales dans le syndrome ascite induit expérimentalement par le sel chez le poulet de chair. Immunhistochemische Identifizierung von Matrixmetalloproteinasen und ihrer Gewebeinhibitoren in Broilern Ziel dieser Studie war es, mittels immunhistochemischer Methoden die Verteilung der Matrixmetalloproteinasen (MMP)-2 und MMP-9 sowie der Gewebeinhibitoren der Matrixmetalloproteinasen (GIMP)-1 und GIMP-2 beim Aszitessyndrom der Broiler in einem durch Salzinjektion induzierten Versuchsmodell zu untersuchen. Das Vorkommen der Enzyme in Lunge, Herz, Leber, Niere und Gehirn wurde semiquantitativ mittels der Streptavidin-Biotin-Peroxidase (Strep-ABC)-Methode unter Verwendung kommerziell erhältlicher primärer monoklonaler Antikörper überprüft. Die Immunfärbung von MMP-2 und -9 war bei den Broilern mit Aszites intensiver und ausgedehnter als bei den Kontrollen, wobei mit zunehmendem Alter sowohl bei den Kontrollen als auch bei den aszitischen Broilern eine Abnahme der Anfärbung zu beobachten war. Das Vorkommen von MMP-9 war negativ korreliert mit dem Vorkommen von GIMP-1-Enzym. Es wird vermutet, dass bei dem durch Salz induzierten experimentellen Aszitessyndrom bei Broilern MMP-2 und MMP-9 bei der Zunahme der Permeabilität der Gefäßwände durch die Zerstörung der Basalmembranen eine Rolle spielen. Identificación de las metaloproteinasas de matriz y de sus inhibidores tisulares en pollos de engorde mediante inmunocitoquímica El objetivo de este estudio fue el de investigar la distribución de metaloproteinasas de matriz (MMP)-2, MMP-9, inhibidores tisulares de metaloproteinasas de matriz (TIMP)-1 y TIMP-2 mediante immunocitoquímica en el síndrome ascítico de pollos de engorde en un modelo experimental inducido por el consumo de sal. La presencia de enzimas en el pulmón, corazón, hígado, riñón y encéfalo fue evaluado semicuantitativamente con el método de estreptavidina-biotina-peroxidasa (Strep-ABC) mediante el uso de anticuerpos primarios monoclonales comerciales. La inmunotinción de MMP-2 y –9 fue más intensa y extensa en los pollos ascíticos que en los controles, aunque se observó una disminución al aumentar la edad en pollos normales y ascíticos. La presencia del enzima MMP-9 se correlacionó negativamente con la presencia del enzima TIMP-1. Se sugiere que los enzimas MMP-2 y MMP-9 pueden jugar un papel en el incremento de la permeabilidad de las paredes vasculares mediante la destrucción de la membrana basal en el síndrome ascítico inducido mediante la ingestión de sal en pollos de engorde.