Human T-cell lines with well-defined T-cell receptor gene rearrangements as controls for the BIOMED-2 multiplex polymerase chain reaction tubes

T细胞受体 基因重排 生物 南方斑点 分子生物学 多路复用 淋巴瘤 多重聚合酶链反应 基因 聚合酶链反应 遗传学 T细胞 免疫学 免疫系统
作者
Yorick Sandberg,Brenda Verhaaf,Ellen J. van Gastel-Mol,I L Wolvers-Tettero,John De Vos,Roderick A.F. MacLeod,Jeroen G. Noordzij,Willem A. Dik,Jacques J. M. van Dongen,Anton W. Langerak
出处
期刊:Leukemia [Springer Nature]
卷期号:21 (2): 230-237 被引量:43
标识
DOI:10.1038/sj.leu.2404486
摘要

The BIOMED-2 multiplex polymerase chain reaction (PCR) tubes for analysis of immunoglobulin and T-cell receptor (TCR) gene rearrangements have recently been introduced as a reliable and easy tool for clonality diagnostics in suspected lymphoproliferations. Quality and performance assessment of PCR-based clonality diagnostics is generally performed using human leukemia/lymphoma cell lines as controls. We evaluated the utility of 30 well-defined human T-cell lines for quality performance testing of the BIOMED-2 PCR primers and protocols. The PCR analyses of the TCR loci were backed up by Southern blot analysis. The clonal TCRB, TCRG and TCRD gene rearrangements were analyzed for gene segment usage and for the size and composition of their junctional regions. In 29 out of 30 cell lines, unique clonal TCR gene rearrangements could be easily detected. Besides their usefulness in molecular clonality diagnostics, these cell lines can now be authenticated based on their TCR gene rearrangement profile. This enables their correct use in molecular clonality diagnostics and in other cancer research studies.
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