Etude des mecanismes regulateurs de l'apoptose dans des cellules dependantes de l'interleukine-3

L'apoptose, une des formes les plus courante de mort cellulaire, est un processus physiologique conserve au cours de l'evolution qui permet une elimination discrete d'un grand nombre de cellules. L'apoptose participe a de multiples fonctions permettant d'assurer le developpement correct et le maintien de l'integrite des organismes multicellulaires. Il est maintenant etabli que sa deregulation a des consequences desastreuses pour l'organisme (cancer, maladies auto-immunes, maladies neurodegeneratives). Dans les cellules mammiferes, le controle de l'apoptose apparait complexe et implique de nombreux genes. Parmi ces genes figurent les caspases (proteases a cysteines activees au cours de l'apoptose et degradant de nombreux substrats), les membres de la famille bcl-2 qu'ils soient anti-apoptotiques (bcl-2, bcl-x. . ) ou proapoptotiques (bax, bad) et apaf-1 qui interagit avec bcl-2 et les caspases. Cependant, la comprehension des mecanismes regulateurs de l'apoptose demeure partielle. En inhibant l'apoptose, les facteurs de croissance jouent un role fondamental dans le maintien de l'homeostasie entre autre du systeme hematopoietique. Nous avons montre que dans les cellules murines baf-3 derivees de la moelle osseuse l'inhibition de l'apoptose se fait a deux niveaux. Le premier qui correspond a l'inhibition de l'apoptose a court terme est independante de la synthese de proteines. Le second correle avec l'induction du gene bcl-x par une voie dependante de la map-kinase et de la pi3-kinase. Nous avons egalement montre que l'inhibition de l'apoptose par l'igf-1 (mais pas par l'il-3) est dependante de l'activation de la pi3-kinase. Pour identifier de nouveaux genes inhibiteurs de l'apoptose, nous avons mis au point et valide un protocole original de mutagenese par insertion retrovirale. Ce protocole nous a permis d'obtenir de nombreux mutants resistants a l'apoptose. Cette strategie nous a permis de montrer que le gene bcl-x est le gene anti-apoptotique majeur dans les cellules baf-3.