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LncRNA SLC9A3-AS1 knockdown increases the sensitivity of liver cancer cell to triptolide by regulating miR-449b-5p-mediated glycolysis

活力测定 生物 基因敲除 雷公藤甲素 癌细胞 MTT法 乳酸脱氢酶A 癌症研究 分子生物学 细胞 糖酵解 生物化学 癌症 细胞凋亡 遗传学
作者
Lei Zhao,Houbin Zhang,Peiyou Ren,Xiangjun Sun
出处
期刊:Biotechnology & Genetic Engineering Reviews [Informa]
卷期号:40 (2): 1389-1405 被引量:6
标识
DOI:10.1080/02648725.2023.2193775
摘要

Triptolide (TP) is involved in the progression of liver cancer. However, the detailed molecular network regulated through TP is still unclear. Long non-coding RNA (LncRNA) SLC9A3 exerts roles in various pathological progresses. Nevertheless, whether SLC9A3 affects the sensitivity of liver cancer cells to TP have not been uncovered. The content of SLC9A3-AS1 and miR-449b-5p was estimated by utilizing quantitative real-time polymerase-chain reaction (qRT-PCR). Cell counting kit 8 (CCK-8) assay was introduced to assess cell viability. Additionally, cell viability as well as invasion was tested via transwell assay. The direct binding between miR-449b-5p and SLC9A3-AS1 or LDHA was confirmed through luciferase reporter gene assay. Moreover, glycolysis rate was tested by calculating the uptake of glucose in addition to the production of lactate in Huh7 cells. LncRNA SLC9A3-AS1 was up-regulated in liver cancer tissue samples and cells. Knockdown of SLC9A3-AS1 notably further inhibited viability, migration as well as invasion in Huh7 cells. MiR-449b-5p was the direct downstream miRNA of SLC9A3-AS1 and was down-regulated by SLC9A3-AS1 in Huh7 cells. In addition, miR-449b-5p was reduced in liver cancer tissues and cells. Overexpressed miR-449b-5p increased the sensitivity of Huh7 cells to TP remarkably. Moreover, miR-449b-5p negatively regulated LDHA expression in Huh7 cells. This work proved that SLC9A3-AS1 increased the sensitivity of liver cancer cells to TP by regulating glycolysis rate mediated via miR-449b-5p/LDHA axis. These findings implied that TP is likely to be a potent agent for treating patients diagnosed with liver cancer.
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