Integrated microfluidic system for rapid screening of CRP aptamers utilizing systematic evolution of ligands by exponential enrichment (SELEX)

适体 指数富集配体系统进化 分析物 寡核苷酸 微流控 SELEX适体技术 DNA 计算生物学 化学 纳米技术 组合化学 生物 色谱法 材料科学 分子生物学 核糖核酸 生物化学 基因
作者
Chao-June Huang,Hsin-I Lin,Shu‐Chu Shiesh,Gwo‐Bin Lee
出处
期刊:Biosensors and Bioelectronics [Elsevier BV]
卷期号:25 (7): 1761-1766 被引量:157
标识
DOI:10.1016/j.bios.2009.12.029
摘要

The systematic evolution of ligands by exponential enrichment (SELEX) is an experimental procedure that allows screening of given molecular targets by desired binding affinities from an initial random pool of oligonucleotides and oligomers. The final products of SELEX are usually referred as aptamers, which are recognized as promising molecules for a variety of biomedical applications. However, SELEX is an iterative process requiring multiple rounds of extraction and amplification that demands significant time and labor. Therefore, this study presents a novel, automatic, miniature SELEX platform. As a demonstration, the rapid screening of C-reactive protein (CRP) aptamers was performed. By utilizing microfluidic technologies and magnetic beads conjugated with CRP, aptamers with a high affinity to CRP were extracted from a random single-strand deoxyribonucleic acid (ssDNA) pool. These aptamers were further amplified by an on-chip polymerase chain reaction (PCR) process. After five consecutive extraction and amplification cycles, a specific aptamer with the highest affinity was screened automatically. The screened aptamers were used as a recognition molecule for the detection of CRP. The developed microsystem demonstrated fast screening of CRP aptamers and can be used as a powerful tool to select analyte-specific aptamers for biomedical applications.

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