已入深夜,您辛苦了!由于当前在线用户较少,发布求助请尽量完整地填写文献信息,科研通机器人24小时在线,伴您度过漫漫科研夜!祝你早点完成任务,早点休息,好梦!

Split activator of CRISPR/Cas12a for direct and sensitive detection of microRNA

反式激活crRNA 化学 核糖核酸 清脆的 核酸 小RNA DNA 引导RNA 计算生物学 寡核苷酸 Cas9 分子生物学 生物化学 基因 生物
作者
Wen He,Xinyu Li,Xinmin Li,Minghui Guo,Mengxuan Zhang,Ruiwei Hu,Menghan Li,Shijia Ding,Yurong Yan
出处
期刊:Analytica Chimica Acta [Elsevier BV]
卷期号:1303: 342477-342477 被引量:13
标识
DOI:10.1016/j.aca.2024.342477
摘要

CRISPR/Cas12a-based nucleic acid assays have been increasingly used for molecular diagnostics. However, most current CRISPR/Cas12a-based RNA assays require the conversion of RNA into DNA by preamplification strategies, which increases the complexity of detection. Here, we found certain chimeric DNA-RNA hybrid single strands could activate the trans-cleavage activity of Cas12a, and then discovered the activating effect of split ssDNA and RNA when they are present simultaneously. As proof of concept, split nucleic acid-activated Cas12a (SNA-Cas12a) strategy was developed for direct detection of miR-155. By adding a short ssDNA to the proximal end of the crRNA spacer sequence, we realized the direct detection of RNA targets using Cas12a. With the assistance of ssDNA, we extended the limitation that CRISPR/Cas12a cannot be activated by RNA targets. In addition, by taking advantage of the programmability of crRNA, the length of its binding to DNA and RNA was optimized to achieve the optimal efficiency in activating Cas12a. The SNA-Cas12a method enabled sensitive miR-155 detection at pM level. This method was simple, rapid, and specific. Thus, we proposed a new Cas12a-based RNA detection strategy that expanded the application of CRISPR/Cas12a.
最长约 10秒,即可获得该文献文件

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
更新
PDF的下载单位、IP信息已删除 (2025-6-4)

科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
骨头发布了新的文献求助10
3秒前
zj发布了新的文献求助10
5秒前
5秒前
无限一凤完成签到 ,获得积分10
7秒前
dadadad完成签到,获得积分10
8秒前
lrid完成签到 ,获得积分10
8秒前
su完成签到 ,获得积分10
10秒前
lone623完成签到 ,获得积分10
12秒前
天真谷蓝完成签到 ,获得积分10
14秒前
量子星尘发布了新的文献求助10
16秒前
珊珊发布了新的文献求助30
18秒前
Hesse完成签到,获得积分10
19秒前
Ascender发布了新的文献求助10
19秒前
任性海冬完成签到,获得积分20
21秒前
琪凯定理发布了新的文献求助10
22秒前
思源应助顺心幻波采纳,获得10
22秒前
23秒前
LFJ完成签到,获得积分10
26秒前
任性海冬发布了新的文献求助10
27秒前
27秒前
板凳完成签到 ,获得积分10
28秒前
28秒前
28秒前
Hao完成签到,获得积分10
29秒前
30秒前
林鼎铭完成签到,获得积分10
30秒前
橘猫发布了新的文献求助10
31秒前
西行龟发布了新的文献求助10
31秒前
32秒前
顺心幻波发布了新的文献求助10
34秒前
汉堡包应助fox采纳,获得10
35秒前
36秒前
38秒前
38秒前
顺利梦之完成签到 ,获得积分10
39秒前
NMZN完成签到,获得积分10
40秒前
科研专家完成签到 ,获得积分10
41秒前
41秒前
Jqq发布了新的文献求助10
41秒前
41秒前
高分求助中
The Mother of All Tableaux Order, Equivalence, and Geometry in the Large-scale Structure of Optimality Theory 2400
Ophthalmic Equipment Market by Devices(surgical: vitreorentinal,IOLs,OVDs,contact lens,RGP lens,backflush,diagnostic&monitoring:OCT,actorefractor,keratometer,tonometer,ophthalmoscpe,OVD), End User,Buying Criteria-Global Forecast to2029 2000
Optimal Transport: A Comprehensive Introduction to Modeling, Analysis, Simulation, Applications 800
Official Methods of Analysis of AOAC INTERNATIONAL 600
ACSM’s Guidelines for Exercise Testing and Prescription, 12th edition 588
A new approach to the extrapolation of accelerated life test data 500
T/CIET 1202-2025 可吸收再生氧化纤维素止血材料 500
热门求助领域 (近24小时)
化学 材料科学 医学 生物 工程类 有机化学 生物化学 物理 内科学 纳米技术 计算机科学 化学工程 复合材料 遗传学 基因 物理化学 催化作用 冶金 细胞生物学 免疫学
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 3953205
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 3498532
关于积分的说明 11092425
捐赠科研通 3229120
什么是DOI,文献DOI怎么找? 1785211
邀请新用户注册赠送积分活动 869286
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 801415