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Viral Vector-Based Transduction of Slice Cultures

转导(生物物理学) 转基因 电穿孔 转染 病毒载体 生物 基因传递 细胞生物学 分子生物学 表情盒 重组DNA 腺相关病毒 载体(分子生物学) 病毒 细胞培养 病毒学 基因 遗传学 生物化学
作者
J. Simon Wiegert,Christine E. Gee,Thomas G. Oertner
出处
期刊:CSH Protocols [Cold Spring Harbor Laboratory Press]
卷期号:2017 (2): pdb.prot094896-pdb.prot094896 被引量:27
标识
DOI:10.1101/pdb.prot094896
摘要

Transgenes can be introduced into the cells of organotypic slice cultures using different delivery methods, such as biolistic transfection, electroporation, and viral vector-based transduction. These methods produce different patterns of transgene expression. Local injection of recombinant adeno-associated virus (rAAV) produces a small cluster of transgene-expressing neurons around the injection site. Expression in individual cells varies with the distance from the injection site, indicating that many neurons take up several rAAV particles. The serotype and promoter also play a role in transgene expression. Here, we present a protocol for the transduction of previously prepared hippocampal slice cultures with rAVV.
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